中文摘要：

以本人筛选得到的二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid, 简称DHA) 高产海洋真菌Thraustochytrium sp.KK17-3为材料, 采用RT-PCR结合RACE技术路线, 克隆DHA生物合成紧密相关的碳链延长酶(Elongase)基因, 实现其在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达, 确定其最佳碳链底物，为利用基因工程技术生产DHA以及其它高度不饱和脂肪酸奠定基础。本项目的研

结论摘要：

利用RT-PCR结合RACE技术，从DHA高产菌株破囊壶菌（Thraustochytrium）中成功克隆了与DHA生物合成相关的两个脂肪酸碳链延长酶（Elongase）TFD6（Genbank accession numberDQ299828）和TFD5（Genbank accession numberDQ299827）全长基因。其中TFD6基因全长813 bp，编码271个氨基酸，分子量31.3 KDa，等电点9.26，疏水性强，具有5个跨膜区；TFD5基因全长828 bp，编码276个氨基酸，分子量31.9 KDa，等电点8.8，具有7个跨膜区，跨膜区的主要结构是β-片层结构与无规则卷曲。TFD6、TFD5与其它延长酶一样，具有一个HXXHH组氨酸高度保守序列，主要位于无规则卷曲中。构建了TFD6、TFD5延长酶酵母表达系统，脂肪酸甲酯的气相色谱分析表明，TFD6可延长C18:3n-6至C20:3n-6，TFD5可延长C20:5n-3至C22:5n-3。拓展了对DHA生物合成相关脱氢酶的基因与表达及DHA高产菌株的分子标记研究。