中文摘要：

细胞周期调节失控是肿瘤细胞无限增殖的核心事件，G1/S转化则为该事件的关键步骤。miR-17-5P通过同步干预多个细胞周期调节蛋白，促进胶质母细胞瘤G1/S转化； miR-7则通过靶向胶质瘤恶性演变的核心通路EGFR/AKT2成员间接调控肿瘤周期。本课题拟利用人工合成的miR-7片段靶向沉默EGFR/AKT2后间接抑制细胞周期G1启动点调节蛋白复合体CyclinD1/CDK4/6的表达，联合si-miR-17-5P对MAPK通路、G1/S检测点调节蛋白复合体CyclinE/CDK2的靶向沉默作用，共同实现对胶质母细胞瘤EGFR下游双通路（PI3K-AKT通路及Ras-Raf-MEK-Erk-MAPK通路）的联合抑制，并在细胞周期G1启动点和G1/S检测点实现双重抑制效应，使肿瘤细胞在癌基因激活与通路链接、细胞周期调控等多阶段、多步骤中实现综合抑制效应。

结论摘要：

研究内容本课题旨在利用人工合成的 miR-7 片段靶向沉默 EGFR/AKT2 后间接抑制细胞周期 G1 启动点调节蛋白复 合体 CyclinD1/CDK4/6 的表达，联合 si-miR-17-5P 对 MAPK 通路、G1/S 检测点调节蛋白复合 体 CyclinE/CDK2 的靶向沉默作用，共同实现对胶质母细胞瘤 EGFR 下游双通路（PI3K-AKT 通路及 Ras-Raf-MEK-Erk-MAPK 通路）的联合抑制，并在细胞周期 G1 启动点和 G1/S 检测点 实现双重抑制效应，使肿瘤细胞在癌基因激活与通路链接、细胞周期调控等多阶段、多步骤 中实现综合抑制效应。研究结果通过研究我们证实接受miR-7和miR-17-5P联合基因转染后胶质瘤U251细胞增殖速度明显减慢，且大部分阻滞于G1期，处于分裂期S期的细胞比例明显减少。与胶质瘤细胞周期相关的P16、P21、CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4和CDK6蛋白表达水平均有明显改变。进一步的机制研究发现miR-7和miR-17-5P联合应用可有效抑制细胞周期G1期调节蛋白复合体CyclinD1/ CDK4/6的活性，并接受P16的协同作用，共同阻遏胶质瘤由G1期向S期转化，进而抑制肿瘤增殖。基于胶质瘤荷瘤鼠皮下模型的体内研究发现miR-7和miR-17-5P联合应用较单独应用肿瘤生长速度更慢，同时出现更多的瘤细胞凋亡。存在的问题和解决途径上述联合治疗并不能从根本上彻底阻遏肿瘤复发。因此我们结合近年来有关于胶质瘤干细胞的最新研究动向，分析认为胶质瘤干细胞的存在可能是胶质瘤复发的根本原因，由此我们开展了一些关于胶质瘤干细胞的研究，并以此为基础成功申请到新的科研课题2项。主要科研成果该课题按照研究计划提前半年时间完成全部实验内容。目前已发表学术论文7篇，其中SCI收录论文2篇，核心期刊5篇，另1篇英文论文已接收。