中文摘要：

急性肺损伤(ALI)是常见危重症，病死率高，其发病机制尚未明了，但趋化因子Fractalkine (FKN)等通过对单核细胞、白细胞及自然杀伤细胞等的黏附和强效趋化作用，参与了脂多糖（LPS）介导的ALI的炎性反应。至目前为止，还没有FKN是如何参与ALI的机理性研究。本研究使用LPS刺激肺上皮细胞，应用RT-PCR、ELISA、免疫蛋白印记、染色质免疫沉淀和激光共聚焦显像等技术，研究MAPKs及NFκB信号通道激活和FKN的表达之间的相互作用关系，探索参与FKN释放的细胞信号转导通道；通过研究LPS 介导的大鼠ALI模型中的肺组织FKN表达水平、以及抑制MAPKs及NFκB信号转导后，对FKN释放的影响，同时观察肺损伤后的病理学改变，探索参与FKN释放的细胞信号转导通道，试图阐明ALI的病因学机理，为有效治疗ALI提供理论依据。

结论摘要：

许多证据表明fractalkine参与了ARDS病程，本项目在细胞和动物模型上，研究Fractalkine (FKN)参与ARDS的调控机制。在使MAPK、NF-κB信号通路的抑制剂SB203580（10μM）、SC-514（10μM）、UO126（10μM）、SP600125（10μM）进行预处理的A549细胞上，采用LPS（10μg-1ml-1）刺激后，RT-PCR检测细胞的FKN mRNA的表达，ELISA检测培养上清液中FKN蛋白，western blotting检测细胞的磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、磷酸化p65蛋白（p-p65），共聚焦显微镜（CLSM）观察p-p38MAPK、p-p65的细胞核转移表达情况。在大鼠模型上，分别经大鼠尾静脉注射SB203580（5mg-1？kg-1）、SC-514（5mg-1？kg-1）or UO126（5mg-1？kg-1）、SP600125（5mg-1？kg-1）对大鼠预处理30分钟后，再注射LPS（5mg-1？kg-1），RT-PCR检测大鼠肺组织的FKN mRNA表达、ELISA检测大鼠肺组织匀浆和大鼠血清FKN蛋白的表达、western blotting检测大鼠肺组织匀浆中p-p38MAPK、p-p65的表达，免疫组织化学方法检测FKN蛋白在大鼠肺组织中的表达布及变化。结果如下1、与对照组相比，LPS刺激后，细胞FKN mRNA和蛋白表达下降（P＜0.05），SB203580、SC-514均能抑制LPS介导的FKN mRNA和蛋白的下降表达（P＜0.05）；LPS使细胞的p-p38MAPK、p-p65蛋白的表达升高，SB203580和SC-514预处理能分别抑制细胞p-p38MAPK、p-p65蛋白的升高表达；荧光染色及CLSM观察显示，使用LPS后出现p-p38MAPK、p-p65蛋白的核转移，使用SB203580和SC-514预处理能分别抑制p-p38MAPK、p-p65蛋白的核转移。而UO126、SP6001252预处理无显著差别。2、与对照组相比，LPS使大鼠肺组织匀浆和血清的FKN蛋白表达下降（P＜0.05），大鼠肺组织匀浆的p-p38MAPK、p-p65蛋白表达上升（P＜0.05），SB203580、SC-514的预处理能抑制大鼠肺组织匀浆和血清的FKN蛋白的下降表达（P＜0.05），S