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中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记的克隆、序列分析及辅助育种应用
  • ISSN号:1009-9980
  • 期刊名称:《果树学报》
  • 时间:0
  • 分类:S663.1[农业科学—果树学;农业科学—园艺学]
  • 作者机构:[1]农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室,陕西省农业分子生物学重点实验室,西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌712100
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.30571280)
中文摘要:

将质粒pWR306中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1300,构建了植物中间表达载体pWR—Ⅱ;将重组质粒pGEM—T-ALDH的醛脱氢酶(ALDH)基因片段定向克隆到pWR—Ⅱ,构建了葡萄ALDH基因的植物过量表达载体pWR—Ⅱ-ALDH。采用改进冻融法将其导入农杆菌EHA105.采用花序浸蘸法转化拟南芥。获得了潮霉素抗性的转化拟南芥植株。PCR检测证明外源基因已整合进拟南芥基因组,Real—time PCR结果表明ALDH基因在转化植株的表达量远高于野生种。转化植株和野生植株在形态上有一定的差异,说明葡萄ALDH基因在拟南芥中表达对其生长发育有一定影响。

英文摘要:

A nucleotide sequence of plasmid pWR306 carrying promotor ED35s, Omega TMV translation enhancer and nopaline synthase terminator was specifically cloned into plasmid pCAMBIAI300 to construct the plant intermediate expression vector pWR-Ⅱ; the segment of aldehydehyde dehydrogenase gene from the recombinant plasmid pGEM-T-ALDH was specifically cloned into intermediate expression vector pWR-II to construct the plant overexpression vector pWR-Ⅱ-ALDH, which was introduced into Agrobacterium strain EHA105 by means of the improved freezing-thawing method and then was transformed into A rabidopsis thaliana by floral dip to obtain transformed plants. PCR analysis indicated that the ALDH gene was indeed integrated into the Arabidopsis thaliana genome,Real-time PCR analysis indicated that the expression of the ALDH gene in transformed plants was far more than that in wild plants. There were some phenotype differences between transformed plants and wild plants,which indicated that the A LDH gene's expression has an impact on the A rabidopsis thaliana' s growth.

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期刊信息
  • 《果树学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:农业部
  • 主办单位:中国农业科学院郑州果树研究所
  • 主编:王志强
  • 地址:河南省郑州市航海东路南中国农业科学院郑州果树研究所
  • 邮编:450009
  • 邮箱:chinagsxb@163.con
  • 电话:0371-65330928 653387308
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-9980
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1308/S
  • 邮发代号:36-93
  • 获奖情况:
  • 获河南省优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:18699