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转 Temporin-GFP山羊乳腺上皮细胞株的筛选和鉴定
  • ISSN号:1000-2286
  • 期刊名称:《江西农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q813.2[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040
  • 相关基金:国家自然科学基金(31000990,30771538)和国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08008-004B)项目资助
中文摘要:

为了获得山羊乳腺特异表达中国林蛙抗菌肽的转基因细胞株,研究利用前期工作中获得的山羊乳腺特异表达载体Tem-GFP-pBC1转染传代培养的山羊乳腺上皮细胞,并经G418筛选获得转基因阳性细胞。其结果,获得特异表达GFP和抗菌肽基因的转基因阳性细胞;转基因阳性细胞和冷冻复苏的转基因阳性细胞经培养,其细胞形态和生长曲线均正常;经PCR检测Tem-GFP-pBC1已整合入山羊乳腺上皮细胞的基因组中,且与对照组相比,转基因细胞可以检测到Tem-GFP的表达。结果表明,获得了能够在山羊乳腺中特异表达Tem-GFP融合蛋白的转基因阳性细胞。

英文摘要:

In order to obtain Rana temporaria chensinensis skin antimicrobial peptide genes expressed in goat mammary epithelial cells ,goat mammary epithelial cells were transfected with mammary gland specific ex-pression vector Tem-GFP-pBC1 constructed in the previous work by cationic liposome method and cultured with G418-resistant cell .After PCR was identified ,the transgenic cell line with Tem was established .The G418 positive cells were detected .The results were as follows .G418-resistant cells could express GFP and Tem .Mor-phology of the transgenic cells after freezing-thawing was similar to that of normal mammary epithelial cells , the cell growth curve was in“S” shape,PCR results showed that the vector constructed was integrated into ge-nome .Compared to the control ,the transgenic cell could express Tem-GFP .The transgenic cells with temporin-GFP were filtrated ,and lay the foundation for the transgenic goat with expression temporin in mammary .

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期刊信息
  • 《江西农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:江西农业大学
  • 主办单位:江西农业大学
  • 主编:石庆华
  • 地址:江西省南昌市经开区志敏大道1101号江西农业大学期刊社
  • 邮编:330045
  • 邮箱:ndxb7775@sina.com
  • 电话:0791-83813246 83828010
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2286
  • 国内统一刊号:ISSN:36-1028/S
  • 邮发代号:44-102
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵双百期刊,国家期刊奖百种重点期刊,中国高校精品科技期刊,华东地区优秀期刊,江西省"名刊建设工程"期刊,江西省优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:20807