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中文摘要：
在前期工作中，已经获得了蜘蛛丝蛋白spidroin1和AvSF1基因的核心序列，同时克隆和筛选到在绵羊成纤维细胞中具有表达活性的角蛋白结合蛋白启动子"KAP6.1"和B2C，并利用这两个启动子构建了可在绵羊皮肤成纤维细胞中特异表达的载体。本项目拟利用绵羊自身产生角蛋白的特性，采用LacZ作为报告基因，检测已克隆的角蛋白启动子"K2.10"、K5、K17和角蛋白结合蛋白启动子"KAP6.1"、B2A及B2C的表达活性，筛选毛囊中高表达活性的启动子，并连接到pcDNA3.1载体上；将多聚化的蜘蛛丝基因核心序列spidroin1和AvSF1分别连接到已筛选的含有被毛特异表达启动子的pcDNA3.1载体上；采用脂质体介导法转染绵羊成纤维细胞，用选择培养基、PCR和Southern杂交等方法筛选整合细胞，传代培养和保存；采用常规的绵羊核移植技术获得重构胚，以探索利用转基因绵羊开发蜘蛛丝蛋白的新途径。
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