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带有GFP的小鼠Sox2基因逆转录病毒载体的构建及其检测
  • ISSN号:1005-2739
  • 期刊名称:黑龙江动物繁殖
  • 时间:2012.1.1
  • 页码:8-11
  • 分类:S814.3[农业科学—畜牧学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]东北林业大学生命科学学院,哈尔滨150040
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(31000990,30771538);中央高校基本科研业务费专项资金资助(DL10BA06)
  • 相关项目:异源因子诱导绵羊体细胞重编程及其多能性基因启动子甲基化的研究
中文摘要:

为了建立体细胞重编程过程中检测Sox2基因表达变化的方法,本研究利用克隆获得的小鼠Sox2基因与逆转录病毒载体pMX—IRES—GFP连接,构建带有报告基因GFP的逆转录病毒载体,将其转染293GP细胞后获得假病毒上清。将获得假病毒上清侵染小鼠成纤维细胞(NIH3T3细胞)后观察GFP的表达和检测Sox2转录量的变化。其结果,成功构建带有GFP的Sox2基因逆转录病毒载体pMX—Sox2-IRES—GFP;将构建的载体转染后293细胞后获得能侵染NIH3T3细胞的假病毒上清,且与未侵染的NIH3T3细胞相比,侵染后的NIH3T3细胞的Sox2表达量提高近10倍。本研究为开展在体细胞重编程过程中Sox2表达与重编程效率的相关性提供依据.

英文摘要:

In order reprogrammlng, to establish the method detecting of Sox2 this study cloned mouse Sox2 gene, and gene expression during somatic cells linked with retroviral vector pMX- IRES-GFP. 293GP cells were transfected with the vector and pVSV-G vector, mouse fibroblasts (NIH3T3 cells) were infected by viral supematant. GFP expression was observed and the amount of Sox2 transcription was tested after infection. The results were showed as followed. The retroviral vector pMX-Sox2-IRES-GFP was constructed successfully, viral supematant was obtained after the vector and pVSV-G co-transfection. Compared to negative control infected NIH3T3 cells expression of Sox2 increased nearly 10-fold.These results would be used for promoting somatic cells reprogramming study.

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期刊信息
  • 《黑龙江动物繁殖》
  • 主管单位:黑龙江省畜牧兽医局
  • 主办单位:黑龙江省家畜遗传资源保护中心
  • 主编:覃能斌
  • 地址:哈尔滨市哈平路243号黑龙江省家畜遗传资源保护中心
  • 邮编:150069
  • 邮箱:hljdwfz@163.com
  • 电话:0451-86644242
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-2739
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1350/Q
  • 邮发代号:14-264
  • 获奖情况:
  • 获第四届全国畜牧兽医优秀期刊评比一等奖、2007年...
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:2093