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TAT-N24穿膜融合多肽对HepG2细胞增殖的影响
  • ISSN号:1672-5069
  • 期刊名称:实用肝脏病杂志
  • 时间:2011
  • 页码:321-322+326
  • 分类:Q7[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科,武汉430030
  • 相关基金:国家“973”计划资助项目(No.2009CB521802); 国家自然科学基金资助项目(No.81171927,30872472,30973496,30800569)
  • 相关项目:miR-363介导DAB2IP调控前列腺癌上皮间质化和肿瘤干细胞抑制肿瘤复发、转移
中文摘要:

目的利用已经构建好的四环素诱导细胞周期素B1(Cyclin B1)表达的单克隆细胞株,探索可能与Cyclin B1相互作用的蛋白。方法加入四环素的单克隆细胞株能表达带有Myc和His标签的Cyclin B1。将未诱导和用四环素诱导48h的细胞裂解后,分别加入10μg Myc的单克隆抗体,用免疫沉淀法(immune precipitation,IP)沉淀可能和Cyclin B1相作用的蛋白,将蛋白混合物行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用考马斯亮蓝染色法和银染法明确差异蛋白,再用质谱(massspectrometry,MASS)行蛋白鉴定。结果用质谱鉴定出的蛋白有细胞周期素依赖蛋白激酶1(Cyclin-dependent kinase1,CDK1),细胞周期素依赖蛋白激酶2(Cyclin-dependent kinase 2,CDK2),有丝分裂阻滞缺失样蛋白1(Mitotic arrest deficient-like protein 1,MAD1-like 1,MAD1L1)和热休克蛋白8(heat shock 70kD protein 8isoform 1)。结论除CyclinB1和CDK1直接相互作用外,Cyclin B1与CDK2、MAD1L1和热休克蛋白8都可能有直接或间接的相互作用。

英文摘要:

Objective To find proteins interacting with Cyclin B1 using the monoclone cell line expressing Cyclin B1 induced by tetracycline.Methods The monoclone cell line could express Cyclin B1 with a Myc and His tag after tetracycline was added.Cells uninduced or induced by tetracycline for 48 h were both lysed,then 10 μg Myc monoclonal antibody was added.Immune precipitation(IP)was used to detect proteins which might interact with Cyclin B1.The protein mixture were run in SDS-PAGE,and the proteins were confirmed by mass spectrometry(MASS) after different bands was cut from SDS-PAGE by coomassie blue staining and silver staining.Results The proteins confirmed by MASS were cyclin-dependent kinase 1(CDK1),CDK2,mitotic arrest deficient-like protein 1(MAD1L1) and heat shock 70kD protein 8 isoform 1.Conclusion Besides the known direct interaction between Cyclin B1 and CDK1,direct or indirect interaction might exist between Cyclin B1 and CDK2,MAD1L1 or heat shock 70kD protein 8 isoform 1.

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期刊信息
  • 《实用肝脏病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:安徽省科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会安徽分会
  • 主编:周天仇
  • 地址:合肥市长江西路424号
  • 邮编:230031
  • 邮箱:sygzbzz@foxmail.com
  • 电话:0511-65142835
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-5069
  • 国内统一刊号:ISSN:34-1270/R
  • 邮发代号:26-201
  • 获奖情况:
  • 2012年华东地区优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,中国中国科技核心期刊
  • 被引量:10904