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反义p55PIK慢病毒载体的构建及其对甲状腺癌细胞FTC236增殖的影响
  • ISSN号:1007-4368
  • 期刊名称:南京医科大学学报(自然科学版)
  • 时间:0
  • 页码:790-794
  • 分类:R736.1[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心,湖北武汉430030
  • 相关基金:国家973计划(2009CB521802);国家自然科学基金(30872472,30973496,30800569);湖北省自然科学基金(2008CDB174,2009CDB239);中央高校基本科研业务费专项资金(2011JC062,2011JC063);华中科技大学自主创新基金(2010MS027)
  • 相关项目:p55PIK在肿瘤侵袭和转移中的作用及其机制研究
中文摘要:

目的:观察反义p55PIK慢病毒对甲状腺癌细胞Frc236的增殖是否有抑制作用。方法:构建含p55PIK反义RNA的慢病毒载体并包装成慢病毒,使之感染FTC236细胞,得到稳定的细胞系后用Westernblot方法检测p55PIK蛋白的表达情况,用Real—time PCR检测p55PIK的mRNA的表达情况。同时用四甲基偶氮唑盐(MTT)法及BrdU掺入法检测各组细胞的增殖情况。结果:构建的慢病毒感染甲状腺癌细胞FTC236的效率约为95%;Westernblot证明反义p55PIK病毒可以使该细胞的p55PIK蛋白水平降低,mRNA水平降为对照组的(47±8)%(P〈0.01)。MTT法检测发现反义p55PIK慢病毒感染后的FTC236细胞增殖明显受到抑制,增殖率为未处理组的(59±19)%(P〈0.05)。且反义p55PIK慢病毒组的平均BrdU掺入率比未处理组降低了10.64%(P〈0.02)。结论:反义055PIK病毒可以通过抑制D55PIK蛋白的表扶而抑制了FTC236细晌的增殆.

英文摘要:

Objective:To elucidate the role of antisense oligodeoxynucleotide of p55PIK inhibiting the proliferation of thyroid carcinoma cells. Methods:The lentivirus package system carrying the antisense RNA of p55PIK was constructed. The FTC236 cell was infected by the virus. Western blot and Reahime PCR were used to confirm the protein content and mRNA level of p55PIK. Then MTr assay and BrdU/PI corporation assay were used to analyze the proliferation of stable ceils. Results:Two stable cell lines,one expressing p55PIK antisense RNA and the other expressing scramble antisense RNA,were constructed, and the p55PIK antisense RNA could knockdown the target protein's expression (P 〈 0.01 ). In MTT assay,the absorbance ratio of the ceils expressing p55PIK antisense RNA is (59 ± 19)% of that in the cells expressing scramble antisense. The BrdU/PI corporation assay showed that the DNA synthetize ratio of cells expressing p55PIK antisense RNA decreased by 11.6% compared with that of ceils expressing scramble antisense. Conclusion:The p55PIK antisense can inhibit proliferation of the thyroid carcinoma cells by knockdown the p55PIK protein expression.

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期刊信息
  • 《南京医科大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:南京医科大学
  • 主编:沈洪兵
  • 地址:南京市龙眠大道101号
  • 邮编:211166
  • 邮箱:nyxb@njmu.edu.cn
  • 电话:025-86869293 86869297
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-4368
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1442/R
  • 邮发代号:28-61
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18896