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新疆雪莲DFR基因的分离及同源遗传转化
  • ISSN号:1673-5102
  • 期刊名称:植物研究
  • 时间:0
  • 页码:695-700
  • 分类:S572[农业科学—烟草工业;农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]新疆师范大学分子生物学与生物信息研究室,新疆830053
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金项目(30960092和30960044)
  • 相关项目:新疆盐渍化条件下面包烘烤品质小麦分子改良研究
中文摘要:

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydronavonol 4-reductase,DFR)是植物重要的次生代谢产物花青素生物合成途径中的关键酶。运用RT-PCR和RACE技术从新疆雪莲(Sasurea involurata Kar.et Kir.)中克隆得到DFR基因(CenBank登录号为JN092126)。DFR基因的cDNA全长序列含有1个1.029bp的开放阅读框(ORF),编码343个氨基酸,该基因推断的蛋白与水母雪莲DFR基因推断的蛋白高度同源,相似性达到92%;以不同物种中DFR氨基酸序列进行比对分析,推断的蛋白含有与NADPH特异结合的结构域。将该基因运用农杆菌介导的叶片转化法进行同源转化,将含有转DFR基因的愈伤组织进行悬浮培养,紫外分光光度法测定愈伤组织的总黄酮含量,结果表明转基因愈伤组织的总黄酮含量明显高于非转基因愈伤组织的含量。该研究为提高新疆雪莲药用化学成分黄酮类物质及实现新疆雪莲花青素的人工生物合成的研究奠定基础,对解决天山雪莲资源匮乏提供参考。

英文摘要:

The dihydroflavonol-4-reductase (DFR) is an important enzyme in plant secondary metabolites and catalyzes the key step in the biosynthesis of anthocyanins. DFR gene (GenBank Accession JN092126 ) was cloned from Saussurea involucrata Kar. et Kir. by RT-PCR and RACE. The eDNA sequence of DFR was consis- ted of 1 029 bp open reading frame (ORF) encoding 343 amino acid, the deduced DFR protein has high homolo- gy with S. medusa (92% identity). Homology analysis showed that deduced DFR protein has the special domain regioselectivity towards NADPH. DFR gene of S. involucrata was under the control of the cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter, homologous transformation was conducted using an Agrobacter-ium rihizogenes-mediated transformation system. The results of UV spectrophotometry showed that Sinvolucrata callus after suspension cul- ture had an obviously higher average content of total flavonoids than non-transgenic callus. This study will im- prove the products of medicinal compositions and realize the synthesis of anthocyanins in S. involucrata.

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期刊信息
  • 《植物研究》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:东北林业大学
  • 主编:付玉洁
  • 地址:哈尔滨市和兴路26号东北林业大学
  • 邮编:150040
  • 邮箱:duanxihua828@163.com
  • 电话:0451-82190611
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-5102
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1480/S
  • 邮发代号:14-77
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:13014