位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
天山雪莲UDP葡萄糖-类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及功能分析
  • ISSN号:1000-3061
  • 期刊名称:生物工程学报
  • 时间:0
  • 页码:705-714
  • 分类:Q523[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]新疆师范大学分子生物学与生物信息研究室,新疆乌鲁木齐830053
  • 相关基金:国家自然科学基金(Nos.30960092,30960044)资助.
  • 相关项目:新疆盐渍化条件下面包烘烤品质小麦分子改良研究
中文摘要:

UDP葡萄糖-类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶(Flavonoid-3-0-glucosyltransferas,3GT)是植物重要的次生代谢产物生物合成途径中的关键酶。文中采用现代生物信息手段,经3GT的同源比对后设计基因特异引物,运用RT-PCR及RACE技术从天山雪莲Saussurea involucrata Kar.et Kir.叶片中克隆得到3GT基因的全长序列fGenBank Accession No.JN092127)。3GT基因的cDNA全长序列含有1个1548bp的开放阅读框(ORF),编码516个氨基酸,该基因推断的蛋白与草莓GT6蛋白的相似性为91%,与毛杨梅3GT的相似性为89%;经序氨基酸序列比对,推断的天山雪莲3GT具有糖基转移酶基因家族特有的结构域PSPG-box。半定量PCR的结果显示,天山雪莲3GT基因在叶及愈伤组织中表达量最高,在根中有少量表达,茎中不表达。将该基因构建到含有35S启动子的植物表达载体上,利用农杆菌介导的遗传转化法进行同源转化,将筛选到的含有转3GT基因的愈伤组织进行悬浮培养,并用紫外分光光度法测量其黄酮含量是非转基因愈伤组织总黄酮平均值的2.06倍。

英文摘要:

The flavonoid-3-O-glucosyltransferas (3GT) is one of the most important enzymes for biosynthesis of plant secondary metabolites. In this paper, the homology analysis and gene special primers design were used. With the methods of mordern molecular biology, the full-length gene of 3GT (GenBank Accession No. JN092127) which was cloned from Saussurea involucrata Kar. et Kir by RT-PCR and RACE. The cDNA sequence of 3GT consisted of 1548 bp open reading frame (ORF) encoding 516 amino acid, the deduced 3GT protein shared 91% and 89% identities with that of Fragaria x ananassa GT6, Manihot esculenta anthocyanidin 3-O-glucosyltransferase. Homology analysis showed that deduced 3GT protein has a glycosyltransferase signature domain PSPG-box. The transcripts of 3GT members were found mainly in leaves and callus. 3GT gene of S. involucrata was under the control of the cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter, homologous transformation used an Agrobacterium rihizogenes-mediated transformation system. The results on UV spectrophotometry showed S. involucrata callus after suspension culture that an average of total flavonoids on transgenic callus was 2.06 times higher than non-transgenic callus.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《生物工程学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:杨胜利
  • 地址:北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:cjb@im.ac.cn
  • 电话:010-64807509
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3061
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1998/Q
  • 邮发代号:82-13
  • 获奖情况:
  • 北京市优秀科技期刊期刊奖,中国科协首届优秀学术期刊奖,2000年中科院优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18441