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一种检测转1Dx5基因小麦植株的新方法
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:生物技术
  • 时间:0
  • 页码:56-58
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学] S336[农业科学—作物遗传育种;农业科学—农艺学]
  • 作者机构:[1]新疆师范大学分子生物学与生物信息研究室,新疆乌鲁木齐830053
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(“新疆盐渍化条件下面包烘烤品质小麦分子改良研究”,30960044),国家自然科学基金项目(“转基因小麦目的基因插入突变及精确鉴定研究”,30960092); 新疆师范大学研究生科技创新项目(“新疆小麦转高分子量麦谷蛋白亚基基因纯合系快速筛选”,20111211)资助~~
  • 相关项目:转基因小麦目的基因插入突变及精确鉴定研究
中文摘要:

目的:建立一种有效区分Glu-1D等位基因的Multiplex-PCR体系,快速检测转1Dx5小麦植株。方法:根据1Dx5和1Dx2亚基基因的区别设计特异的PCR引物,通过多重PCR技术检测花粉管通道法转化1Dx5核心片段的转基因T1代植株。结果:Multiplex-PCR能够在转基因T1代材料中扩增Glu-1D等位基因的特征条带,分别为343bp、320bp的1Dx5基因特异片段以及361bp的1Dx2基因特异片段,与预期结果一致。结论:该技术能够检测多个靶基因,有效地区分转基因Glu-1D上的等位基因,证实外源1Dx5基因已整合到受体基因组中,对检测基因组庞大、外源基因序列GC含量高且与内源基因同源性高的转基因小麦十分有效。

英文摘要:

Objective:To establish an effective system distinction between Glu-1D allele Multiplex-PCR system.Method:From the differences between 1Dx5 and 1Dx2 gene,the PCR specific primers were designed.The transgenic 1Dx5 T1 plants were detected by multiplex PCR,were obtained from ORF of 1Dx5 gene was transformed into Xindong-26 via pollen tube pathway.Result:the target band of exogenous gene was amplified in T1 generation of transgenic material,the size of amplified products were 343bp,320bp of 1Dx5,and 361bp of 1Dx2.Conclusion:This technique minght effectively distinguish between the alleles Glu-1D by detected multiple target genes,and confirmed the foreign 1Dx5 gene was integrated into the recipient genome.as well as,the technique is very effective for the detection of large foreign gene sequences of high GC content and with high homology to endogenous genes in transgenic wheat.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503