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衣原体GPIC噬菌体衣壳蛋白Vp2的克隆、表达和鉴定
  • ISSN号:1001-7089
  • 期刊名称:《中国皮肤性病学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学] R691.3[医药卫生—泌尿科学;医药卫生—临床医学;医药卫生—外科学]
  • 作者机构:[1]天津医科大学总医院皮肤性病科/天津性传播疾病研究所,天津300052
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30671879)
中文摘要:

目的 获得衣原体GHC噬菌体衣壳蛋白Vp2基因及其蛋白.方法 提取噬菌体φCPG1及其核酸,用PCR技术扩增Vp2基因片段,再将其定位插入到原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达质粒.然后将重组表达质粒转化入大肠杆菌(BL-21)中,并用酶切分析、PCR扩增及部分序列测定等方法对重组质粒进行了鉴定.然后诱导表达,用SDS-PAGE及蛋白印迹进行鉴定.结果 所获得的Vp2基因片段经测序,长度为561bp,检索确认其序列与Genebank一致.对重组质粒进行诱导表达,SDS-PAGE和蛋白质印迹均显示获得相对分子质量约32kDa的衣原体GPIC噬菌体衣壳蛋白Vp2.结论 成功表达了噬菌体衣壳蛋白Vp2,为进一步研究其作用机制和临床应用打下基础.

英文摘要:

Objective To clone and express chlamydial GPIC capsid Vp2 gene, and identify its protein. Methods The complete sequence of Vp2 gene from φCPG1 phage was amplified. The amplicor was cut by restriction endonuclease,linked to piasmid vector pET30a ( + ), and transformed into E. coil. The expression of recombinant Vp2 was identified by SDS-PAGE electrophoresis and Western blot. Results The recombinant 561bp gene was sequenced and proved to be q~CPGI Vp2 by searching Genebank. Expression of 32 kDa capsid was confirmed by SDS-PAGE and Western blot. Conclusion Chlamydial GPIC capsid Vp2 gene and protein were obtained, which is helpful for the next study.

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期刊信息
  • 《中国皮肤性病学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西安交通大学
  • 主编:彭振辉
  • 地址:陕西省西安市新城区皇城西路30号
  • 邮编:710004
  • 邮箱:CJDV_XG@126.com
  • 电话:029-87217312 87678312
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-7089
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1197/R
  • 邮发代号:52-17
  • 获奖情况:
  • 中国科技论文统计源期刊,中国生物医学类核心期刊,中国学术期刊综合评价数据库来源期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:25128