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一个小型人酪氨酸羟化酶基因启动子的分离和活性分析
  • ISSN号:1006-7795
  • 期刊名称:《首都医科大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q71[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室神经变性病教育部重点实验室,神经变性病教育部重点实验室, [2]首都医科大学神经科学研究所
  • 相关基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2006AA02A408)、国家自然科学基金(30430280,30570646)、北京市自然科学基金(7022011)和北京市属高等学校人才强教计划资助项目
中文摘要:

目的探讨酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)基因上游调控区的功能。方法PCR法扩增人TH基因上游片段,插入pGL3-Basic质粒,构建一个表达荧光素酶的报告基因。将报告基因瞬间转染MES23.5、293及Cos7细胞,用Dual Luciferase Assay法测定目的DNA片段的启动子活性。结果测序结果表明,分离的DNA片段长度为520bp,与人TH基因-493/+27区一致。与pGL3-Basic质粒相比较,构建的报告基因在3种细胞中显著表达(P〈0.01)。结论TH基因-493/+27区具有明显的启动子活性,构建的报告基因有助于研究TH基因表达的调节。

英文摘要:

Objective To investigate the regulatory functions of human tyrosine hydroxylase gene upstream region. Methods A human TH gene upstream fragment was amplified by PCR, and was inserted into plasmid pGL3-Basic, to build a luciferase reporter vector. The reporter vector was transient transfected into MES23.5, 293T and Cos7 cells, and the promoter activity was mensurated using Dual Luciferase Assay system. Results Length of the isolated DNA fragment is 520 bp, which located at - 495/+ 25 region of the human tyrosine hydroxylase gene. By comparison with pGL3-Basic vector, the recombinant reporter vector could significantly expressed luciferase in three types of cells ( P 〈 0.01 ). Conclusion TH gene - 493/+ 27 region possesses promoter activity, and the constructed reporter gene will help us study the regulation of TH gene expression.

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期刊信息
  • 《首都医科大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:北京市教育委员会
  • 主办单位:首都医科大学
  • 主编:王晓民
  • 地址:北京丰台区右安门外西头条10号
  • 邮编:100069
  • 邮箱:sydxb@ccmu.edu.cn
  • 电话:010-83911346 83911348
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-7795
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3662/R
  • 邮发代号:82-56
  • 获奖情况:
  • 第三届中国高校优秀科技期刊奖,中国科技论文在线...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:14086