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脂筏特异蛋白荧光标记及在PC12细胞中的功能
  • ISSN号:1671-4512
  • 期刊名称:《华中科技大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q81[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]华中科技大学生命科学与技术学院,湖北武汉430074
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30470646,30130230);国家重点基础研究发展计划资助项目(2004CB720000),湖北省自然科学基金资助项目(2003ABA096).
中文摘要:

采用PCR技术从小鼠cDNA文库中扩增出编码caveolin-1和flotillin-1基因片断,通过TOPO载体将基因克隆到表达载体pEGFP,转化至大肠杆菌DH5α中,抽提、纯化后将重组质粒转入PC12细胞中表达,用TIRFM观察高K^+刺激下胞内标记蛋白的动态分布情况.实验结果显示重组质粒caveolin-1-pEGFP和flotillin-1-pEGFP在PC12细胞中具有一定的功能,而且caveolin-1和flotillin-1在发挥功能时可能有一个向膜转运的过程.

英文摘要:

To detect the distribution of vesicle taking caveolin-1-pEGFP and flotillin-1-pEGFP, the DNA sequences of caveolin-1 and flotillin-1 from mouse cDNA bank were amplified with PCR technology. Utilizing TOPO middle vector, genes were cloned to the MSC of expression vector-pEGFP. After the two recombinant plasmids were transfected into PC12 cell, the intracellular distribution of themaeker proteins was observed on the 60 mmol K^+ stimulation with TIRFM. The results showed recombinant plasmids of caveolin-1-pEGFP and flotillin-1-pEGFP had some function in PC12 cell. The dynamic process of the cell activity was observed firstly with TIRFM, which overcame the deficiency that the prevenient data were acquired from cells in static states. The experiments further showed that caveolin-1 and flotillin-1 might act to cell membrane, which have laid a foundation for the further study of the molecule function of caveolin-1 and flotillin-1.

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期刊信息
  • 《华中科技大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:华中科技大学
  • 主编:丁烈云
  • 地址:武汉珞喻路1037号
  • 邮编:430074
  • 邮箱:hgxbs@mail.hust.edu.cn
  • 电话:027-87543916 87544294
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-4512
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1658/N
  • 邮发代号:38-9
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊,首届国家期刊奖,第二届全国优秀科技期刊评比一等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国剑桥科学文摘,英国科学文摘数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:21013