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菠菜叶绿体CF1-ATP合酶的分离纯化及其结构的原子力显微镜研究
  • ISSN号:1000-6737
  • 期刊名称:《生物物理学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q615[生物学—生物物理学]
  • 作者机构:[1]陕西师范大学物理学与信息技术学院生物物理与生物医学工程研究室,陕西西安710062
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金项目(20572067)和教育部科学技术研究重点项目(104167)
中文摘要:

用纤维素DE-52柱层析和硫酸铵分级分离法快速分离,纯化获得CF1-ATP合酶,聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对其纯度和凝胶内酶活性进行检测,研究了温度,pH值、盐浓度对CF1水解酶活性的影响,用原子力显微镜对CF1的形态结构进行了观察。结果发现,当pH值为8.0时,CF1可在0℃存放数天并保持其50%的活性,20%的甲醇溶液能够有效地保护酶分子的结构;实验还通过低温盐解作用获得了具有活性的亚基;用原子力显微镜观测显示CF1-ATP合酶分子平均大小约为18nm,按其直径大小可以分为三类,推测其分别对应着ATP合酶的三种状态,即空置态、疏松结合态和紧密结合态。

英文摘要:

CF1-ATPase was isolated and purified from spinach chloroplast by cellulose DE-52 chromatography and ammonium sulfate fractionation. Then its purity and in-gel activity were detected through PAGE. The effects of temperature, pH value and salt concentration on the activity of CF1-ATPase were also studied, and the topography of CF1-ATPase was observed by AFM. It was found that the activity kept 50% at 0℃ several days while pH value was 8.0, and that 20% methanol protected its molecule structure effectively. Besides, the authors obtained active subunits through incubating in 1 mol/L KC1 at 0℃. By AFM observation, the enzyme molecules were average 18 nm in diameter, and were sorted into 3 groups corresponding to three states (Omit state, Loose state and Tight state) of the enzyme respectively.

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期刊信息
  • 《生物物理学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国生物物理学会
  • 主编:沈恂
  • 地址:北京朝阳区大屯路15号生物物理研究所内
  • 邮编:100101
  • 邮箱:acta@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888458
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-6737
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1992/Q
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 二次获得中国科协优秀科技期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:7189