多囊卵巢综合征(Polycystic ovarian syndrome,PCOS)是排卵障碍性不孕的主要原因,对反复促排卵未孕的PCOS患者,最终需借助体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)妊娠。在IVF-ET中发现部分PCOS患者卵子、胚胎质量较差,影响治疗结局。卵子与其周围颗粒细胞的相互作用,是调控卵子发育的关键因素。PCOS患者颗粒细胞的基因表达是否与卵子、胚胎的发育潜能有关?本研究拟通过cDNA microarray技术从颗粒细胞获得与卵子、胚胎发育质量相关的基因,并通过RT-PCR及Western blotting等技术研究差异基因在不同质量的卵子、胚胎发育不同阶段的颗粒细胞的表达,结合卵泡液生化测定和胚胎代谢产物测定,希望通过体外培养系统成份改变提高PCOS患者卵子、胚胎发育潜能,最大限度的提高妊娠率。
Polycystic ovary syndrome;cumulus cells;different expressed genes;oocyte maturation;embryo development
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是育龄期妇女常见的内分泌紊乱性疾病,卵泡发育过程中卵泡液中异常的内分泌和旁分泌影响到卵子发育的微环境,降低了胚胎发育潜能,从而导致PCOS患者不孕。颗粒细胞与卵母细胞间的对话机制对于卵母细胞的正常发育至关重要。本研究以PCOS患者的不同成熟度卵子(MII和MI)的颗粒细胞为材料,采用基因芯片技术,筛选到可能与PCOS患者卵子成熟的基因59个,对差异基因的GO和pathway分析发现,差异基因的功能涉及多个信号通路(如neuroactive ligand-receptor interaction ,Calcium signaling pathway,Cytokine-cytokine receptor interaction,Focal adhesion, Glycine, serine and threonine metabolism,Wnt signaling pathway,Type II diabetes mellitus,等)。继而对筛选到的部分差异基因在PCOS患者卵子成熟、受精、胚胎发育不同时期的表达变化进行了分析,发现颗粒细胞中的某些基因(RUNX2,LHCGR,TNIK,SOCS3)可以作为预测PCOS患者卵子的成熟度或胚胎的发育潜能的分子标记。该研究的结果初步揭示了PCOS患者卵子成熟及胚胎发育的分子调控机理,相关研究结果对于IVF过程中PCOS患者卵子或胚胎的筛选具有重要的理论意义和临床价值。