乳酸菌介导黏膜免疫传到途径和可能作用机制的研究(No.30671573),课题组按照计划重点开展研究工作。构建了绿色荧光蛋白乳酸菌表达载体pW425t-GFP,获得以绿色荧光蛋白基因(GFP)为示踪物构建了绿色荧光蛋白标记的嗜酸乳杆菌。将上述重组菌口服接种雏鸡、仔猪与小鼠,观察该重组菌在肠道中的分布及其与宿主肠上皮细胞间的联系,结果证实了重组基因工程乳酸菌可以回归动物消化道,并且在各肠道组织中细菌数量随时间变化的规律。同时将含有SO7基因的重组乳酸菌菌株回归鸡消化道,通过绿色荧光蛋白示踪对该基因工程乳酸菌在雏鸡盲肠定植情况进行了分析,结果表明转球虫SO7基因工程乳酸菌至少可以在雏鸡盲肠中存活3个月以上。并且具有非常好的保护效果。获得了猪A组轮状病毒VP6保护性抗原基因、鸡新城疫病毒HN保护性抗原基因;构建了乳酸菌重组表达载体pW425et-VP6和pW425et-HN,并获得相应重组基因工程乳酸菌菌株。对猪轮状病毒重组基因工程乳酸菌口服制剂进行了临床试验研究,免疫效果非常好。已经发表国内重点期刊7篇,会议文章1篇,申报发明专利2项,培养研究生16名。实验结果及文章还在进一步整理发表。
英文主题词Gene Engineering LAB, Mucosal Immune,Functional Mechanism