生殖细胞的发生是发育生物学研究的核心,本项目通过基因克隆技术获得曼氏无针乌贼生殖相关DEAD-box 家族基因(vasa基因,pl10基因和p68基因)全长序列,并对基因序列进行结构分析和功能预测;采用 荧光定量PCR方法检测DEAD-box 家族基因在成体组织、性腺发育周期以及胚胎和幼体发育中的时空表达,分析DEAD-box 家族基因表达的特异性,筛选生殖细胞分化特异性表达基因作为分子标记;以地高辛标记的 RNA 为探针,采用切片原位杂交和整体原位杂交方法检测基因在性腺发育周期以及胚胎和幼虫发育中的表达,获得曼氏无针乌贼生殖细胞发育表达图式,确定曼氏无针乌贼原生殖细胞起源和分化模式,初步建立曼氏无针乌贼生殖细胞起源及迁移至性腺的基本路径,建立头足类生殖细胞发生的基本模型,为进一步的生殖调控研究奠定基础。
英文主题词Sepiella maindroni;DEAD-Box Family;germ cells;expression pattern;