胃癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,发病率较高,且呈上升的趋势。目前胃癌的传统疗法中,手术治疗仅能有效切除肉眼可见肿瘤,无法保证切除所有肿瘤细胞。而几乎所有的抗肿瘤化疗药物都有剂量限制性毒副反应。另一方面,肿瘤细胞对药物不敏感,或增强了耐受性,使疗效有限。生物治疗由于其独特的治疗作用已日益引起人们的重视,但目前多数生物制剂价格高、产生一定的副作用。因此寻找具有预防、治疗胃癌的新途径、新方法无疑具有重要意义。抗癌活性肽来源于动物脾脏,用现代生物技术分离提取,前期的研究表明,抗癌活性肽是一种无毒副作用,可长期反复使用,具有较好地抗癌作用的生物制剂。本项目将在对抗癌活性肽进一步纯化后,以体外细胞培养及建立裸鼠胃癌模型,结合电子显微镜、流式细胞术及基因芯片技术,探讨抗癌活性肽对胃癌细胞周期及凋亡的调控作用,期望阐明抗癌活性肽抗胃癌的机制,为进一步地深入研究、开发利用提供理论依据及数据。
(1)ACBP-S体外抑制人胃癌细胞BGC-823 、 MGC-803细胞的增殖,其抑制作用具有时间及浓度依赖性,最大抑制率分别为84.4%及86.6%。(2)光镜及电镜下分析以及流式细胞术分析证实ACBP-S诱导胃癌细胞凋亡的作用(72h凋亡率对照1.03±0.04 ACBP-S组3.81±0.37);RT-PCR证实了ACBP-S对凋亡相关基因的表达具有调控作用 (3) 流式细胞术分析ACBP-S对细胞周期的影响,证实了ACBP-S将胃癌细胞周期阻滞在G1期;并对调控细胞周期基因p27 p21 p16 表达具有调控作用。(4)基因芯片分析了ACBP-S对凋亡、细胞周期、增殖相关基因的影响。(5)裸鼠体内实验及芯片分析表明,其可抑制肿瘤的生长,抑制率达到34.18% - - 48.08% ,对肿瘤组织细胞进行的免疫组织化学染色分析,证实ACBP-S对细胞增殖相关基因PCNA、凋亡、细胞周期相关基因的表达具有一定的调控作用。(6)抗癌活性肽对鼻咽癌、肝癌和乳腺癌细胞增殖具有抑制作用。寻找靶向性强,副作用小的抗癌物质是世界范围内研究的热点,因此成果为临床研究奠定基础