中文摘要：

再灌注治疗是急性心肌梗死最为有效的治疗手段，但会引起再灌注损伤。研究证实缺血后适应处理能够有效减轻心肌缺血再灌注损伤，但最新研究发现缺血后适应的心肌保护作用存在显著的年龄异质性，其机制与老龄缺血心肌中ERK1/2信号通路未有效激活有关。研究表明CaMEK基因转染能特异性激活ERK1/2信号通路，减轻心肌的缺血再灌注损伤。据此，本课题拟构建携带CaMEK基因的重组9-型腺相关病毒载体，靶向转导老龄小鼠心脏，采用心肌缺血后适应模型，以期通过激活心肌中ERK1/2信号通路恢复缺血后适应对老龄心肌的保护作用；通过检测ERK1/2通路相关信号分子及凋亡蛋白表达、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、线粒体损伤、氧化应激、梗死面积、心功能等指标，研究CaMEK基因靶向激活ERK1/2信号通路减轻老龄心肌缺血再灌注损伤的分子机制，为减轻老龄AMI患者心肌缺血再灌注损伤、改善预后提供新的思路和干预靶点。

结论摘要：

再灌注治疗是急性心肌梗死最为有效的治疗手段，但会引起再灌注损伤。本课题首先证实了缺血后适应心肌保护作用存在显著的年龄异质性，缺血后适应可有效减轻年轻心肌缺血再灌注损伤，其机制是通过激活ERK1/2信号通路实现的，而缺血后适应对老龄心肌的保护作用与老龄缺血心肌中ERK1/2信号通路未有效激活有关。本课题构建了携带CaMEK基因的重组9型腺相关病毒载体，转染心肌细胞并高效表达，体外实验证实CaMEK基因转染可有效激活ERK1/2信号通路相关信号分子的表达并有效抑制心肌细胞凋亡。rAA9-eGFP尾静脉转导后可在心肌组织中高效表达，并对机体其它器官组织无不良影响；明确病毒注射的最佳剂量为1×1011vg/只，确定在心肌表达的高峰时间点。rAAV9-CaMEK基因转导小鼠心肌后，可高效激活心肌ERK1/2信号通路，启动心肌内源性保护反应机制，心肌梗死面积显著减少，显著抑制心肌细胞凋亡，有效的减轻老龄心肌缺血再灌注损伤。为减轻老龄AMI患者心肌缺血再灌注损伤、改善预后提供新的思路和干预靶点。