中文摘要：

体细胞克隆动物的成功是几十年来生物学领域的重大突破之一。克隆技术为研究配子和胚胎发生、细胞和组织分化、基因表达调控、核质互作等机理提供了极为有效的工具。克隆动物目前的成功率低于3%，雪貂克隆的成功率仅有1.8％。雪貂（Mustela Pulourius Furo）已逐渐成为生殖生理学，内分泌学和病毒学研究极好的动物模型。本项目利用体细胞克隆技术，以及细胞生物学、免疫细胞化学等技术与手段，对雪貂体细胞克隆胚胎细胞核的核膜改建、细胞核重编程的时程和形态学变化，不同细胞类型和刺激因素对克隆胚胎细胞核重编程的影响进行了深入研究。研究发现钙离子载体与6-DMAP和细胞松弛素联合作用，可以使雪貂体细胞克隆胚胎的细胞核发生早熟染色体凝集和形成原核。而单独作用咖啡因不能使雪貂克隆胚胎形成原核。另外，以卵丘细胞作为供核细胞所构建的克隆胚胎，其细胞核开始重编程的时间比以胎儿成纤维细胞作为供核细胞所构建的克隆胚胎要早。将体细胞克隆技术和基因打靶技术相结合，我们成功地获得敲除纤维化囊肿基因的克隆雪貂。本项研究为改善动物体细胞克隆效率，为人类疾病雪貂动物模型的广泛应用提供理论依据。