中文摘要：

病毒性疾病已成为人类和畜禽养殖业最大的危害之一，抗病毒西兽药全面被禁用使中兽药已成为临床治疗的主要武器之一，但中药抗病毒的机制尚待深入研究。本室的研究发现部分中药多糖、黄酮等成分修饰后增强了其抗病毒作用，但同时也发现，虽然某些药物成分修饰前后增强特异性免疫的作用相似，但对一些并非完全由病毒直接损伤细胞而致病的病毒病的抵抗作用却差异很大，表明特异性免疫调节可能并非其唯一的抗病毒病机制。因此，本项目以鸭病毒性肝炎为切入点，采用细胞培养、定量PCR、免疫荧光和ELISA等技术动态比较分析了几种中药多糖和黄酮成分与其衍生物对鸭体内生化酶、自由基和相关细胞因子、病毒核酸量和特异性免疫，及其对鸭肝炎病毒吸附、复制过程、mRNA合成和VP1蛋白表达的影响及异同，以比较研究中药多糖和黄酮成分与其衍生物抗鸭病毒性肝炎的直接和间接作用机制，研发抗鸭病毒性肝炎新中兽药，并为利用中兽药防控其他病毒性传染病提供参考

结论摘要：

病毒性疾病已成为人类和畜禽养殖业最大的危害之一，抗病毒西兽药全面被禁用和人类对食品安全的要求日益提高，使得中兽药已成为兽医临床治疗用的主要武器之一。目前普遍认为中药抗病毒的机制主要与免疫调控有关。本室前期的研究发现部分中药多糖成分分子修饰可增强其抗病毒作用，但对一些非直接损伤细胞而致病的病毒病而言，特异性免疫调节可能并非其唯一的抗病毒病机制。本项目以鸭病毒性肝炎为疾病模型，成功修饰7种多糖和黄酮成分后，采用鸭胚肝细胞培养技术比较了7种中药多糖和黄酮成分及其修饰物体外抗DHAV作用，筛选出体外抗DHAV感染鸭胚肝细胞效果较好的4种中药成分APS、BSRPS、EF、BA，发现分子修饰可明显提高BSRPS、EF及APS体外抗DHAV感染细胞作用，sBSRPS、pEF比BSRPS、EF能更显著降低雏鸭的死亡率，减轻肝脏病理变化，显著降低DHAV攻毒鸭体内急性期（8h）的病毒含量，减轻病毒感染引起的谷丙转氨酶、白蛋白、白球比、肌酐、谷丙/谷草等肝损伤示病性指标的变化；sAPS也优于APS，但仅可延缓DVH疾病进程和改善部分肝损伤指标。BSRPS、EF、APS及其分子修饰物均可清除DHAV感染产生的自由基，从而减轻肝损伤，降低死亡率；sBSRPS和pEF比未修饰物还能更为显著的调节机体免疫应答，而APS和sAPS则不明显。体外淋转试验证实，BSRPS和EF、sBSRPS和pEF均可单独和配合PHA（或LPS）刺激T(或B)淋巴细胞转化，且修饰物的作用均优于未修饰物。以Hinokitiol和FK506为促氧化剂及免疫抑制剂，验证BSRPS和sBSRPS、EF和pEF治疗DVH的体内作用途径，证实BSRPS的抗氧化损伤作用对其治疗DVH的效果的影响是主要的，sBSRPS的免疫增强作用在其治疗DVH的过程中则是极其重要的；而抗氧化和免疫调节对于EF和pEF治疗DVH均起到了重要作用。采用直接荧光免疫法和实时荧光定量PCR反应法分析了BSRPS、EF、BA、APS及其分子修饰物对DHAV在细胞中增殖过程的影响，证明上述几种中药成分分子修饰与病毒吸附、复制和释放环节没有必然的直接联系，上述几种药物对病毒复制、释放普遍具有较好的抑制作用，仅抑制效率不一致。APS和sAPS在体外具良好抗DHAV作用，在体内却无明显作用，这反而证明对于上述抗病毒药物而言，对机体整体的调控可能更重要