以口腔角质细胞株为研究对象,采用共聚焦显微镜进行形态学观察;Transwell进行细胞移行(migration)及与其相关的粘附、侵袭等功能测试;流式细胞术等进行细胞的生存、凋亡与增殖指数测试;蛋白杂交及蛋白芯片(protein microarrays)等技术进行信息传导研究,从而了解白念菌对角质上皮细胞移行及相关的灶性粘附蛋白激酶(FAK )信息通路等的影响;其成果不仅可为白色念珠菌对人类细胞的
本课题以口腔角质细胞株为研究对象,用白念刺激细胞后观察细胞形态学和移行功能的变化以及与移行密切相关的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)和灶性粘附激酶(FAK)信息通路的变化,同时通过蛋白组学技术寻找其它与移行密切相关的信息通路,并采用蛋白芯片技术对信息通路上的相关蛋白进行测定,随后采用功能性抗体或化学拮抗剂实验予以验证,从而来探索白念与口腔角质细胞交互作用过程中是否会改变细胞的移行能力,并对其相关信息通路进行研究。通过本研究发现白念可通过增强口腔角质细胞的移行能力从而改变细胞的生物学行为。ERK和FAK信息通路的活化可能是口腔角质细胞抵抗白念感染的早期应答反应。它们参与了白念诱导的口腔角质细胞移行能力改变过程,且ERK和FAK特异性抑制剂可在一定程度上逆转白念的作用。可望进一步通过对这些信息通路蛋白的研究,以阻断相关信息通路的激活为研发靶点,开发出阻抑白念与口腔角质细胞相互作用的新制剂。