中文摘要：

肝郁脾虚证是临床常见证候之一。本组题组通过慢性束缚应激方法建立的模型较好地反映了肝郁脾虚证的病理生理基础，本申请项目拟在前期工作基础上，将量表学的评价方法引入，严格按照量表的制作流程，研制出信度、效度均佳且具有中医特色的肝郁脾虚大鼠模型评价量表，以完善该证候大鼠模型评价体系，为规范证候模型评价体系提供依据。同时，利用全基因组芯片技术, 筛选肝郁脾虚证模型大鼠海马差异表达基因，并应用生物信息学技术构建肝郁脾虚证模型大鼠海马相关基因差异表达谱，结合生物信息学和分子生物学方法，密切与该证候模型大鼠学习与记忆、情绪反应、以及前期工作基础有关海马的功能和结构变化进行相关分析，确定肝郁脾虚证模型大鼠海马重要基因作用路径和核心调控基因；从基因功能模块中去发现该证候的内在本质, 可望从基因水平为肝郁脾虚证的病理生理基础提供实验依据。并明确逍遥散作用机制及其含药血清对缺氧应激处理的海马原代细胞的保护作用。

结论摘要：

建立了具有良好信度、效度的的慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠模型评价量表在确定了肝郁、脾虚、肝郁脾虚、以及应激等基本概念后，参照中医临床量表或问卷的研制过程，结合文献研究和动物实验方法，按照国际上量表研制的原理和一般程序，在中医理论知识的指导下，进行“慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠模型评价量表”的研制。形成了“慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠模型筛选量表”，共4个维度，48个条目，根据对动物模型的观察和统计分析，共删除16个条目，加上难以观察的6个条目，结果剩余26个条目，经过重新编排后，形成“慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠模型观察表”；并进一步对动物模型进行观察，最终形成了“慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠模型评价量表2版筛选表”，共有5个维度，30个条目组成；并建立慢性束缚应激肝郁脾虚大鼠面部特征图像资料库。完成肝郁脾虚证模型大鼠海马相关基因差异表达谱的分析，并明确重要基因作用路径和核心调控基因。利用基因芯片检测海马差异基因表达谱并进行生物信息学分析，GO功能分析发现（1）海马差异表达基因涉及多个功能基因群，参与的显著分子功能为细胞外基质结构的组成、蛋白结合、药物结合、肽结合、跨膜转运活性、信号转导活性、底物特异性转运活性、转录因子活性、分子适配器活性、抗原结合、神经递质转运活性、模式结合等方面。（2）海马差异基因参与的显著生物学过程为发育过程、生物调节、多细胞生物体的过程、对刺激的反应、免疫系统过程等方面。肝郁脾虚证海马相关差异表达基因存在复杂的基因转录调控网络，糖皮质激素水平的升高导致了网络中一列系分子事件的发生，慢性束缚应激后大鼠海马神经元生长受到抑制，神经元的凋亡加速；损害了海马的学习记忆功能。发表学术论文6篇，其中SCI收录5篇；培养博士研究生1名、硕士研究生2名；研究成果在国内外学术会议上报告3次。