中文摘要：

进行性对称性红斑角化症（PSEK）是一种呈常染色体显性遗传的单基因皮肤病，主要表现为皮肤角化过程异常，申请人在上一国家自然基金项目支持下，已将本病致病基因定位在21q11.2-21q21.2，但致病基因尚未明确。外显子测序是利用序列捕获技术将全基因组外显子区域DNA捕捉并富集后进行高通量测序的基因组分析方法，已被国内外成功用于鉴定一些单基因病的致病基因。本课题组已经利用安捷伦SureSelect外显子捕获系统和HiSeq 2000 测序系统对一个汉族人PSEK大家系进行初筛，结果提示在定位区域存在多个基因变异位点。拟进一步增加样本数，利用外显子测序方法缩小范围，并利用测序和功能学方法加以验证，明确本病的致病基因。本研究成果有助于了解PSEK 的分子发病机制，可能获得自主知识产权，为本病的基因诊断提供理论基础，同时可加深对生理性和病理性角化过程的理解，有助于研究其他角化性皮肤病。

结论摘要：

进行性对称性红斑角化症（PSEK）是一种呈常染色体显性遗传的单基因皮肤病，主要表现为皮肤角化过程异常，申请人在上一国家自然基金项目支持下，已将该病致病基因定位在21q11.2-q21.2，但致病基因尚未明确。本项目研究拟进一步利用外显子测序方法缩小范围，并利用测序和功能学方法加以验证，明确本病的致病基因。本课题组通过对两个PSEK家系进行了全外显子组测序和验证研究，结果未能在21q11.2-q21.2区域内鉴定出该病的致病基因。课题组随后扩大研究范围，在另外收集的两个家系对候选基因LOR, GJB3和 GJB4进行突变位点筛查，以及在收集到的一例散发患者，利用测序平台对GJB2、GJB3、GJB4、GJB6、ARS (component B)和LOR基因的外显子和侧翼区域进行了测序研究，虽然在这些基因未发现PSEK的致病突变，但却提示了PSEK遗传异质性的存在。课题组随后及时调整课题研究方向，利用全基因组外显子测序技术对点状掌趾角化症（PPK）和浅表播散型光化型汗孔角化病（DSAP）开展了全基因组外显子测序研究，成功鉴定出了中国人群PPK的两个致病基因COL14A1和AAGAB，研究发现了COL14A1错义突变（c.4505C→T），以及AAGAB的六个致病突变（c.552_554TAG>AT等）；DSAP两个家系的全基因组外显子测序和验证研究发现该病的另外一个致病基因SLC17A9的两个突变c.932G>A和c.25C>T，该研究不仅鉴定出DSAP另一个新的致病基因的同时，也发现异常的囊泡转运蛋白与DSAP发病具有相关性，这两项研究证实了外显子测序技术路线的可行性和科学性，同时致病基因的成功鉴定为这两种疾病的预防，诊断和治疗提供了新的见解。课题组后续准备研究如下一方面根据新的策略，重新对2014年底测得的PSEK全基因组基因分型数据进行连锁分析，以期能验证或缩小以前得到的连锁区域，或者得到一个与疾病表型共分离的连锁区域，进而对前期的全基因组外显子测序数据重新分析，对外显子数据分析得到的新的连锁区域的变异位点在其他家系成员中进行验证，以期在外显子区域或剪切位点发现致病变异；另一方面，考虑到PSEK可能是由结构变异或者CNV变异等外显子组测序无法检测到的变异所引起来的，所以下一步拟开展全基因组测序研究。