如何实现功能寡糖的高通量筛选及构效关系评估一直是整个寡糖产业链的核心和难题,目前尚无有效方法。为解决该问题,本课题拟以申请人已掌握的高通量分析"糖- 蛋白"作用关系的拟糖脂糖芯片体系为基础,针对目前因无法实现芯片上糖探针的实时测定以及AF647 做为靶蛋白检测标记时灵敏度相对较低,而使得糖芯片尚不能用于"糖-蛋白"构效关系评估的缺陷,利用已有的葡聚寡糖库和CR3 靶标蛋白,首先将灵敏的NBD荧光标记引入到葡聚寡糖探针,通过分析荧光强度实现芯片上寡糖探针的软测定;然后用检测灵敏度比AF647 高100 倍的量子点作为检测标记来实现CR3 蛋白的高灵敏实时检测;最后通过分析量子点/NBD 荧光值比率从而建立高灵敏、高通量的功能寡糖筛选和构效关系评估体系,同时实现CR3 与葡聚寡糖之间的构效关系评估。本研究对加快我国功能糖的筛选与开发、提升我国在功能寡糖领域的研发水平将起重要促进作用。
英文主题词Oligosaccharides;Sequence define;ESI-CID-MSMS;DC-SIGN;The relationship of structure and function