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基于ESI-CID-MS/MS离子碎片峰特征的香菇多糖水解机制及系列香菇寡糖的制备
  • ISSN号:0251-0790
  • 期刊名称:高等学校化学学报
  • 时间:2014.11.10
  • 页码:2329-2334
  • 分类:O629.1[理学—有机化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室,无锡214122, [2]江南大学生物工程学院食品科学与技术国家重点实验室,无锡214122, [3]江苏瑞光生物科技有限公司,无锡214125
  • 相关基金:国家自然科学基金(批准号:31201384,3117164); 国家博士后科学基金(批准号:2012M20996); 江苏省博士后基金和江苏省资助博士后基金(批准号:1301011B); 国家建设高水平大学公派研究生项目(批准号:2008679005); 高等学校学科创新引智计划(批准号:111-2-06); 中央高校基本科研业务费专项资金(批准号:JUSRP1007)资助,感谢英国帝国理工学院糖科学实验室柴文刚高级研究员和张一兵博士在质谱解析方面的帮助.
  • 相关项目:微生物β-葡聚寡糖最小功能单元的挖掘及其构效关系研究
中文摘要:

将香菇多糖和0.02 mol/L三氟乙酸(TFA)溶液按照1 mg∶200μL比例混合并于100℃水解,然后利用快速蛋白液相色谱(FPLC)技术对分别水解2,4,6 h的水解产物中不同聚合度寡糖的组成与丰度进行分析,从而确定最佳水解时间;用确定的最佳时间对水解残留多糖重复水解3次,直至多糖沉淀消失为止,然后分别对水解产物进行FPLC分离并依次收集每批次的七糖.对七糖进行ESI-CID-MS/MS分析,结合β-1,3-二糖、七糖及β-1,6-葡聚寡糖二糖的ESI-CID-MS/MS质谱特征,可获得每次水解产物中寡糖的结构信息,进而获得香菇多糖的水解机制;最后用P4凝胶柱对水解产物进行色谱分离,获得具有不同聚合度的全序列寡糖.结果表明,香菇多糖的最佳水解时间为4 h,在不同批次的水解过程中香菇寡糖的结构由β-1,3/1,6-寡糖过渡为纯β-1,3-寡糖.

英文摘要:

To acquire the mechanism of lentinan hydrolysis and full series of gluco-oligosaccharides from hydrolyzed lentinan,the hydrolysis time of lentinan treated with 0. 02 mol /L trifluoroacetic acid( TFA) at 100 ℃was optimized through analysis the distribution of different degree of polymerization( DP) oligosaccharides at2,4,and 6 h. And then lentinan hydrolysis was repeated another three times until no precipitation can be observed under optimal hydrolysis time. The mass spectrometry character of 7-mer oligosaccharides from all the four batch hydrolysis products was analyzed using ESI-CID-MS /MS based on the mass spectrometry character of 7-mer β-1,3-and β-1,6-gluco-oligosaccharides,and acquiring a hydrolysis mechanism. Finally,all the four batch hydrolysis products were combined and separated with P4 column and full series of gluco-oligosacchaides from 2-mer to 13-mer were acquired. The optimal time for lentinan hydrolysis was 4 h,and β-1,3 /1,6-glucooligosaccharides in hydrolysis lentinan was observed at the first batch,and then the amount of β-1,3 /1,6-gluco-oligosaccharides reduced with the increasing of hydrolysis times,and there only observed β-1,3-gluco-oligosaccharides at the fourth hydrolysis products. This results also suggested that the triple helix structure zone containing β-1,3 /1,6-linkage of lentinan is loose,but the only containing β-1,3-linkage triple helix structure zone in lentinan is tight. The theory acquired in this work will supply useful information for preparation glucooligosaccharides in large-scale and it also expand the gluco-oligosaccharides library for exploring protein-carbohydrate interaction using carbohydrate microarray.

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期刊信息
  • 《高等学校化学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学 南开大学
  • 主编:周其凤
  • 地址:吉林大学南胡校区
  • 邮编:130012
  • 邮箱:cjcu@jlu.edu.cn
  • 电话:0431-88499216
  • 国际标准刊号:ISSN:0251-0790
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1131/O6
  • 邮发代号:12-40
  • 获奖情况:
  • 首届及第二届国家期刊奖,连续两届“百种中国杰出学术期刊”,中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:50676