小鸭病毒性肝炎是危害商品鸭的主要病毒性传染病之一,但国内外有关鸭肝炎病毒(DHV)的基因组结构和功能、分子致病机制和分子诊断技术的研究完全是一片空白,导致目前鸭肝炎病毒的分类地位不能确定,对该病毒的检测和致病机制的研究无法进一步深入到分子水平。本项目拟通过超速离心分别纯化1、3型和新型鸭肝炎病毒,提取病毒RNA,利用寡核苷酸引物合成cDNA,利用快速扩增cDNA末端(5'/3'-RACE)技术对cDNA片段进行克隆和序列分析,运用生物信息技术对这3种鸭肝炎病毒基因组的结构和功能进行分析预测,确定3种病毒之间的相互关系以及病毒的确切分类地位,为建立简便、快速的病毒核酸检测技术,研究鸭肝炎病毒的分子致病机制奠定基础。
鸭病毒性肝炎(Duck virus hepatitis, DVH)简称鸭肝炎,是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)引起的一种急性、高度致死性的传染病,主要危害4周龄以内的雏鸭。DHV有三种血清型,我国主要流行Ⅰ型DHV。此外近几年报道了有Ⅰ型变异株和新型鸭肝炎病毒。目前国内外对DHV分子生物学特性的研究甚少且不够深入,仅有少数关于Ⅰ型DHV基因组序列测定与分析的研究报道。本研究旨在进一步测定Ⅰ型DHV及其变异株的基因组序列并分析其遗传变异特点,为该病的防治提供科学的理论依据。本研究主要进行了5株DHV的全基因组克隆、测定了病毒的基因组序列并分析了其基因组的结构特点。研究结果表明,Ⅰ型DHV基因组大小约为7.6kb,类似于小RNA病毒科成员的基因组大小,具有相似的切割位点和蛋白保守基序,还具有一些独特的特点。新型DHV的基因组比Ⅰ型DHV大,具有Ⅰ型DHV的大部分特点,亦具有一些不同于Ⅰ型DHV的基因组结构特点。本研究结果对于从分子水平上了解国内DHV分离株的遗传变异特点、对于进一步研究DHV的基因组功能以及养禽生产中对DHV的防控均具有一定的现实意义。