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人噬菌体抗体库的构建及人源性IL-17单链抗体的筛选
  • ISSN号：1674-8182
  • 期刊名称：《中国临床研究》
  • 时间：0
  • 分类：Q813[生物学—生物工程]
  • 作者机构：[1]深圳大学第一附属医院深圳市第二人民医院,广东深圳518035, [2]中国科学院深圳先进技术研究院抗体药物研究中心,广东深圳518035
  • 相关基金：深圳市科技创新基础研究项目（深科技创新[2013]171号）
作者： 钮敏红[1], 闫晓霏, 吕卫东[1], 万晓春[2]
关键词： 白细胞介素-17, 噬菌体展示抗体库, 单链抗体, 类风湿关节炎
中文摘要：

目的通过噬菌体展示技术构建人源单链抗体库,筛选抗IL-17的特异性抗体并鉴定。方法通过采集35位类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成c DNA,PCR扩增人H链和L链可变区抗体基因。利用SOE-PCR法将VH和VL片段拼接成Sc Fv片段并插入噬菌体载体p CANTAB5E中,构建人源噬菌体单链抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,挑取单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为3.5×10~8的噬菌体抗体库,从中筛选到5株阳性克隆,ELISA证实其对抗原IL-17具有较强的结合性及中和活性。结论成功构建了人源噬菌体单链抗体库,从中获得具有抗IL-17的人源Sc Fv抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。

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期刊信息
  • 《中国临床研究》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会
  • 主编：徐肇敏
  • 地址：南京市山西路57号
  • 邮编：210009
  • 邮箱：zglczz@163.com
  • 电话：025-83243580
  • 国际标准刊号：ISSN：1674-8182
  • 国内统一刊号：ISSN：32-1811/R
  • 邮发代号:28-234
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:10089