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非洲爪蟾肝细胞原代培养方法
  • ISSN号:1673-5897
  • 期刊名称:生态毒理学报
  • 时间:0
  • 页码:613-617
  • 语言:中文
  • 分类:Q813.1[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]河北大学化学与环境科学学院,河北保定071002, [2]中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室,北京100085
  • 相关基金:中国科学院知识创新重要方向性项目(No.KZCX2-YW-420-3);国家自然科学基金项目(No.20677074;No.20437020)
  • 相关项目:多溴联苯醚对两栖动物的生态毒理学效应
中文摘要:

非洲爪蟾是研究内分泌干扰物的良好模型动物,其体外肝细胞可用于类雌激素活性评价、污染物代谢等研究。论文探讨了非洲爪蟾肝细胞原代培养的方法,采用两步原位灌注法分离非洲爪蟾肝细胞,通过胶原酶的作用使细胞之间解离,后经过一系列转速的离心,获得纯化的肝实质细胞。研究结果表明,采用此法获得的细胞数量为2.5-5×10^6个,细胞成活率达95%以上,纯度在95%以上,细胞胞体透亮,折光性强,状态良好。培养24h后贴壁较好,每2d换液1次,可培养8-10d,细胞可满足多种后续实验的要求。

英文摘要:

Xenopus laevis is a good model to study endocrine disruptor, and the hepatocytes are widely used for assaying estrogenic activity and studying metabolism of endocrine disruptors. The present study aims to introduce a primary cultured protocol on hepatocytes of Xenopus laevis. A two-step in situ perfusion method was used. The collagenase was used to digest collagen in the liver tissue, and the centrifugation steps followed to free the dispersed cells from unwanted tissue material and the erythrocytes. The final cell preparation was seeded at a density of 10^5·mL^-1, and about 2.5-5×10^6 cells were obtained totally. The cells could be well-maintained for 8-10 days by replacing the culture medium every 2 days. The primary cultured hepatocytes could be well subjected to lots of follow-up experiments.

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期刊信息
  • 《生态毒理学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生态环境研究中心
  • 主编:王子健
  • 地址:北京市海淀区双清路18号北京2871信箱
  • 邮编:100085
  • 邮箱:stdlxb@rcees.ac.cn
  • 电话:010-62941072
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-5897
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5470/X
  • 邮发代号:2-303
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:4571