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芝麻主要过敏原油质蛋白的基因克隆和原核表达
  • ISSN号:1007-9084
  • 期刊名称:《中国油料作物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所,广东深圳518060
  • 相关基金:国家自然科学基金(30871752); 深圳市深港创新圈项目; 深圳大学校科研基金(200712、200807); 国家质检总局项目
中文摘要:

为克隆黑、白芝麻主要过敏原油质蛋白Oleosins的基因并在原核细胞中对其进行表达,本研究分别提取黑、白芝麻的总RNA,逆转录合成cDNA,根据序列设计简并引物,扩增芝麻主要过敏原油质蛋白Oleosins基因的完整开放阅读框,并与pET-28a载体连接,测序鉴定后转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3)及用IPTG诱导表达。结果表明克隆获得黑、白芝麻主要过敏原油质蛋白Oleosins的全长基因约为438bp的开放阅读框(包括终止密码子),编码145个氨基酸。所编码的蛋白相对分子质量约为15.5kDa,为小分子量蛋白,等电点为5.18,与理论值相符。序列同源性分析发现其与数据库中已知的黑、白芝麻油质蛋白Oleosins基因同源性很高(GenBank黑、白芝麻油质蛋白基因登录号分别为EU999158和EU999159),并在DE3中高效表达。

英文摘要:

RT-PCR method was applied to clone the full-length of the major allergen oleosins gene from sesame seeds. The specific primers were designed and the ORF of oleosins from the sesame seeds was amplified and cloned into the expression vector pET-28a. The recombinant oleosins of sesame seeds was expressed in E.coli BL21(DE3).Results indicated that the cloned cDNA ORF sequence contained 438bp encoding for 145 amino acids sequence.Sequence analysis showed that the encoded protein had a MW 15.5kDa and pI 5.18. The GenBank accession numbers of these clones were EU999158 and EU999159,which were almost identical with oleosins gene from sesame seeds. The deduced protein was therefore regarded as the major allergen of sesame seeds,which will be used to further study sesame seeds related allergy.

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期刊信息
  • 《中国油料作物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国农科院油料作物研究所
  • 主办单位:中国农业科学院油料作物研究所
  • 主编:廖伯寿
  • 地址:湖北省武汉市武昌徐东二路2号油料所内
  • 邮编:430062
  • 邮箱:ylxb@oilcrops.cn
  • 电话:027-86813823
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-9084
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1429/S
  • 邮发代号:38-13
  • 获奖情况:
  • 分别于2008年、2011年和2014年连续三届被评为中国...,是北京大学2004-2014年《中文核心期刊要目总览》...,2016年版《中国科技期刊引证报告(核心版)》公布...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:11301