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优化蕺菜属ITS-PCR扩增条件的研究
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q781[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]西华师范大学生命科学学院,四川南充637002, [2]四川农业大学农学院,四川雅安625014
  • 相关基金:四川省教育厅重点资助项目(2003 A011);教育部留学回国人员科研启动基金项目资助
中文摘要:

目的:建立蕺菜rDNA ITS扩增反应的优化体系。方法:以蕺菜DNA为模板,采用单因素试验设计,对影响蕺菜rDNAITS区扩增的重要参数进行了优化试验。结果:最优蕺菜ITS-PCR的反应体系为25μl反应体系中含Taq酶0.75U、Mg^2+2.5mmol/L、dNTP0.15mmol/L、引物对0.6μmol/L、模板DNA10ng。扩增程序为在94℃下预变性4min,然后进行36个循环(94℃变性45s,60℃退火50s,72℃延伸90s),最后在72℃延伸8min。结论:这一体系的建立为利用蕺菜rDNAITS区研究蕺菜种质资源的系统进化提供了标准化程序。

英文摘要:

Objective:we optimized PCR conditions for amplifying rDNA ITS from Houttuynia Thunb. Method and Result:The results indicated that the best ITS-PCR reaction system should follow the conditions as follows: Taq DNA polymorase0.75U, Mg^2+ 2.5mmol/L, dNTP 0.15mmol/L, primers 0.6μmol/L, DNA 10ng. PCR procedures are described as follows: 94℃ for 4min, followed by 36 cycles (94℃ for 45s, 60℃ for 50s, 72℃ for 90s),finally extended at 72℃ for 8min. Conclusion:The result provided a standard ITS-PCR program for the analysis of phylogenic and evolutionary of Houttuynia Thunb.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
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  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503