中文摘要：

本项目通过国内外研究进展分析，拟进行"α-2,3-唾液酸细胞受体介导鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染鸡气管黏膜上皮细胞及其对病毒增殖水平的影响"的研究，旨在从分子水平上阐明"α-2,3-唾液酸受体介导IBV感染和增殖作用的机理"。本项目设计了2 方面试验进行研究①构建鸡α-2,3-唾液酸重组慢病毒表达载体，以天然非被IBV感染的鸡气管黏膜基底细胞为转染和表达模型，研究α-2,3-唾液酸受体是否能介导IBV吸附和侵入基底细胞；②以可被IBV感染的鸡气管黏膜纤毛细胞和杯状细胞为感染模型，检测不同组织亲嗜性IBV毒株对细胞的吸附能力和侵入能力，分析IBV增殖滴度高低是否与α-2,3-唾液酸受体和IBV的亲和力强弱有关。本项目研究有助于弄清IBV感染及其组织细胞嗜性的分子机制。

结论摘要：

本研究利用流式细胞仪技术，成功从鸡气管黏膜上皮细胞中将基底细胞、纤毛细胞和杯状细胞分选出来，为IBV相关研究提供良好的种子细胞。利用慢病毒表达系统，成功将α-2,3-唾液酸受体在基底细胞膜上进行了表达，并进行了基底细胞及人工表达α-2,3-唾液酸受体的基底细胞接种IBV毒株试验，结果表明该两种基底细胞均不能感染IBV，结果提示IBV感染细胞可能不仅仅依赖α-2,3-唾液酸受体，至少还有其他一种或一种以上的受体参与IBV的感染。另外该研究结果还提示，因在机体中基底细胞可以分化成为纤毛细胞和杯状细胞，故今后可以体外人工对基底细胞进行诱导分化研究，找到基底细胞能够感染IBV的临界状态，并分析诱导前后细胞表面相关受体的变化，有助于弄清IBV感染受体的类型与机制。本项目纤毛细胞和杯状细胞感染IBV研究表明，4种不同组织亲嗜性IBV毒株均能够感染纤毛细胞和杯状细胞，结果表明纤毛细胞和杯状细胞是研究IBV感染或增殖的良好细胞材料。同时本研究初次提出纤毛细胞和杯状细胞体外培养条件可能与培养体系中氧气含量之间的相关性，该研究正在进行，预期研究结果有助于优化该两种细胞的体外培养技术。