利用反向遗传技术研究衣壳蛋白在兔瘟病毒致病机制中的作用-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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利用反向遗传技术研究衣壳蛋白在兔瘟病毒致病机制中的作用

项目名称：利用反向遗传技术研究衣壳蛋白在兔瘟病毒致病机制中的作用
项目类别：面上项目
批准号：30870114
申请代码：C010802
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2009-01-01-2011-12-31

项目负责人：刘光清
负责人职称：研究员
依托单位：浙江省农业科学院
批准年度：2008

中文摘要：

本项目的研究内容及结果主要体现在以下几点（1）构建了缺失VP60氨基端、缺失VP60羧基端和缺失VP60的突变体，建立了稳定表达VP60的细胞系，证明了RHDV衣壳蛋白是维持RHDV感染性的必需结构蛋白，缺失该蛋白RHDV突变体将丧失感染性，但是RHDV的基因组仍能够复制；（2）利用哺乳动物细胞的双杂交系统、免疫共聚焦和免疫共沉淀等方法研究了VP60与VP10之间的相互作用。首次证明RHDV VP60与VP10之间存在特异性相互作用，当将VP60截断成两段时，VP60与VP10之间的相互作用被严重削弱，提示RHDV结构蛋白之间的相互作用高度依赖于衣壳蛋白的结构;（3）构建了重组RHDV亚基因组（sgRNA）以及缺失次级结构蛋白（VP10）亚基因组的杆状病毒，不仅实现了RHDV 亚基因组在昆虫细胞中的高效表达，而且表达产物具有良好免疫原性；（4）通过构建缺失VP10的重组亚基因组-杆状病毒，证实VP10不能影响病毒空衣壳的正常组装，VP60可以独自组装成病毒样颗粒，并具有类似完整病毒的生物特性。上述研究结果为进一步研究RHDV的致病机制和病毒的表达调控提供了有价值的参考资料。

中文主题词：兔瘟；RHDV；衣壳蛋白；VP60；反向遗传技术

结论摘要：

英文主题词Rabbit hemorrhagic disease virus；capsid protein;VP60;VP10;Revers genetic technology

成果综合统计