中文摘要：

以胆固醇合成中的关键酶，羊毛甾醇14-α去甲基酶（CYP51）和3-羟-3-甲基戊二酰-CoA还原酶（HMG-CoA还原酶，HMGR）为靶基因，通过小鼠肝细胞体外培养、尾静脉注射以及制作转基因敲减小鼠等方法对siRNA能否起到降血脂的作用进行了可行性评价。结果发现，经尾静脉注射将CYP51基因的siRNA导入小鼠肝脏，不但能显著(干扰效率达90%)下调目的基因的表达（90%），导致血浆胆固醇水平下降，还会使血浆低密度脂蛋白的水平下调50%左右，从而起到降血脂的目的。因siRNA分子直接使用极易失活，造成小鼠活体尾静脉注射所得干扰效果出现个体差异，需长期多批次实验才能获得较稳定的结果。为此，我们在敲减HMGR基因时采取了不同的策略,首先通过体外培养小鼠肝癌细胞系筛选到了沉默HMGR基因的shRNA分子（干扰效率达70%），在此基础上通过原核注射法和睾丸注射法（携带shRNA表达载体的磁小体受磁场作用穿透组织进入精子）获得了转基因阳性动物，并开始基因敲减小鼠血脂水平检测等工作。总体上利用siRNA降血脂可行，但如何安全便利地给药是亟待解决的问题。