核桃是人们最早发现的他感植物。前期已研究显示,核桃叶次生物质对烟草花叶病毒(TMV)、植物病原菌、蚜虫等有害生物具有较好的抑杀效果,并首次发现核桃叶中黄酮类化合物具有抗TMV的活性。但核桃青皮、叶中其他抗病毒物质及作用机理急待深入研究。本研究采用超临界流体萃取和有机溶剂冷浸的方法提取核桃叶、青皮中次生物质,以TMV为主要研究对象,在活性跟踪指导下,确定了适宜的提取溶剂、提取方法和提取工艺;明确了醇提物的乙酸乙酯萃取相为抗病毒物质所在的活性部位。萃取相经多次层析分离与纯化,获得5个具有较高活性的抗病毒化合物。对黄酮类化合物的构效分析显示,甙元活性大于甙活性,双糖甙活性大于单糖甙活性,甙元中B环羟基增加活性增大。抗TMV作用机理研究显示,化合物B不仅对TMV具有体外钝化和阻止病毒初侵染作用;还可通过增加叶绿素和类黄酮含量、提高SOD和POD活性、降低MDA含量来增强烟草的抗病毒能力,提高其抗病性。这些研究成果为核桃副产品的合理利用,创制新型植物源抗病毒剂提供了重要理论依据。成果用于农作物病害的防治,有利于生态环境保护,对促进农业生态系统稳定、有序、协调发展具有重要意义。
英文主题词walnut; secondary substances; plant virus; mechanism