中文摘要：

本课题纯化了花生种子中一种凝集素，对其进行了性质分析、质谱鉴定及表达特征分析，结果表明，这种凝集素的分子量为29KD，对乳糖具有强烈的结合特性；pH为5.0-11.0范围内较稳定，经55℃保温10min后活性完全消失；能够凝集胃癌和肝癌肿瘤细胞；在花生的生长初期这种凝集素的存在部位是子叶和根。本项目拟在前期工作的基础上，克隆该凝集素的基因，研究它在病虫害入侵后的表达变化，研究它在不同品种、不同时期、不同生长条件下的表达特点，阐明其生理功能；构建表达载体，活化重组蛋白；利用表面等离子共振仪、荧光光谱、核磁共振仪等手段研究凝集素与配体（抗体）的作用位点和方式，阐明其多糖识别结构域的结构及作用方式。解析花生中凝集素的结构和功能，为阐明凝集素与配体（或生物大分子）的作用模式奠定基础，花生品质改良提供新的思路，为凝集素在肿瘤诊断和治疗过程中的进一步应用提供依

结论摘要：

花生是我国重要的油料作物、经济作物和出口创汇作物。本研究利用乳糖结合的琼脂糖层析柱通过亲和层析从花生种子中纯化了一种凝集素，命名为为AHL。AHL对唾液酸酶处理后的人的A/B/O型血细胞具有较强的结合特性；MALDI-TOF-TOF MS分析结果显示AHL与编号gi|1942899的花生凝集素A蛋白是同一种蛋白质；AHL对一些能引起花生疾病的革兰氏阴性菌及真菌孢子有结合特异性；我们研究了不同花生组织和花生生长不同时期的AHL表达特点，在检测的6个花生品种中鲁花12号AHL的表达量最高；将AHL基因引入大肠杆菌表达载体中，获得了AHL的重组表达蛋白，利用纯化的重组表达蛋白制备了AHL的多克隆抗体；利用Western-Blot技术实现了多克隆抗体与纯化天然蛋白的杂交；构建了带有花生凝集素AHL基因与报告基因YFP的融合蛋白的表达载体，通过瞬时表达试验分析表明凝集素基因AHL基因定位于细胞壁和细胞膜；利用荧光发射光谱研究凝集素与其配体半乳糖的相互作用；利用软件对花生凝集素蛋白（AHL）的3D结构进行模拟，并对其与配体作用方式进行分析。