抑癌基因启动子甲基化是在人类多种恶性肿瘤组织细胞中经常发生的早期表观遗传学改变。文献报道和我们的研究工作均表明,在肿瘤患者血浆循环DNA中也存在抑癌基因启动子高甲基化改变,定量检测肿瘤患者血浆抑癌基因甲基化水平,对于肿瘤的早期诊断、预后判断和疗效监测,都有重要的临床意义。但是,由于缺乏灵敏准确的定量检测技术,血浆抑癌基因甲基化定量检测未能在临床开展应用。本研究拟设计一种新型的甲基化内部标准品,以消除核酸提取纯化、DNA化学修饰以及荧光定量PCR扩增中的偏差,并针对肺癌中甲基化率较高的RASSF1A基因,建立一种带有甲基化内标的双重实时荧光定量PCR技术,用于血浆RASSF1A基因甲基化的定量检测,该技术将有助于血浆DNA甲基化定量检测在恶性肿瘤实验室诊断中的临床应用。
英文主题词methylation;internal standard;plasma;RASSF1A;quantification