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鸟枪法筛选枯草芽孢杆菌基因强启动子及对黄牛GHRL基因的表达
  • ISSN号:1001-411X
  • 期刊名称:《华南农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]西北农林科技大学动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西杨凌712100, [2]华南农业大学动物科学学院,广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室,广东广州510642, [3]广东海洋大学农学院,广东湛江524088, [4]徐州师范大学细胞与分子生物学研究所,江苏徐州221116
  • 相关基金:国家自然科学基金(30972080); 国家科技支撑计划项目(2008BADB2B03-19); 国家肉牛产业体系(CARS-38); 国家转基因专项(2009ZX08009-157B 2008ZX08007-002 2009ZX08007-005B-07); 中国博士后科学基金(20100480763)
中文摘要:

利用鸟枪法通过大肠埃希菌-枯草芽孢杆菌启动子探针载体分离到枯草芽孢杆菌168菌株的103个基因启动子片段,发现1个672 bp的启动子片段P3.4.23,能够在大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌高效启动报告基因β-半乳糖苷酶的表达,其酶活性分别达到3 418、2 877 U/mL.相似性分析表明P3.4.23启动子片段具有枯草芽孢杆菌基因启动子的保守序列,并确定其转录活性区域位于5~333 bp,为yxiE基因的调控序列.将黄牛GHRL基因导入到启动子亚克隆序列下游,使该基因在枯草芽孢杆菌中得到了表达.

英文摘要:

Through shot-gun method,one hundred and three DNA segments of promoter from genomic library of 168 Bacillus subtilis were detected with Escherichia coli-B.subtilis shuttle plasmid.The activities of the reporter gene of bgaB driven by one promoter fragment,P3.4.23,exhibited high expression strength both in E.coli and B.subtilis.The fragment was 672 bp long and stronger than P43 promoter.The activities of bgaB promoted by the fragment reached to 3 418 and 2 877 U/mL in E.coli and B.subtilis,respectively.The blasting result showed that the fragment had the conserved sequences of B.subtilis promoters.The putative promoter was sub-cloned and identified,which showed that its important region for transcription,5-333 bp,is the regulatory region of yxiE gene.GHRL gene of cattle was drove by the sub-cloned promoter.The SDS-PAGE showed that GHRL gene was expressed in B.subtilis.

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期刊信息
  • 《华南农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:华南农业大学
  • 主办单位:华南农业大学
  • 主编:陈晓阳
  • 地址:广州天河区五山路483号
  • 邮编:510642
  • 邮箱:journal@scau.edu.cn
  • 电话:020-85280069 38746672
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-411X
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1110/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 广东省第三届优秀科学技术期刊奖(2000),全国高校优秀科技期刊一等奖(2004),第三届国家期刊奖百种重点期刊(2004),中国高校精品科技期刊(2006)
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:16179