许多益生乳酸菌对机体具有免疫调节作用,但目前多数研究者不能从整体上对其调控机制进行阐述。而基因芯片技术的发展为乳酸菌的研究提供了全新的研究手段。本项目以具有良好免疫调节特性的益生乳酸菌-嗜酸乳杆菌NCFM(Lactobacillus acidophilus NCFM)为研究对象,采用人全基因组芯片对NCFM作用后人肠道上皮细胞Caco-2的基因谱进行分析,根据基因表达谱数据,以Gene Ontology分类(GO分类)筛选确定免疫相关基因,并利用体外细胞模型和小鼠体内对免疫相关基因的动态变化规律进行研究,最后通过分析信号通路被选择性抑制后的表现,进一步确定NCFM促使宿主产生免疫调节作用的信号通路以及它们之间的相互联系,从而全面、深入揭示其调节机体免疫功能的作用机制,为开发更为科学、健康的益生功能食品提供理论依据。
Lactobacillus acidophilus;immune-related genes;dynamics;signaling pathway;gene chip
许多益生乳酸菌对机体具有免疫调节作用,但目前多数研究者不能从整体上对其调控机制进行阐述。而基因芯片技术的发展为乳酸菌的研究提供了全新的研究手段。本项目以具有良好免疫调节特性的益生乳酸菌-嗜酸乳杆菌 NCFM(Lactobacillus acidophilus NCFM)为研究对象,采用人全基因组芯片对 NCFM 作用后人肠道上皮细胞 Caco-2 的基因表达谱进行分析,利用GCOS 1.4软件处理和分析数据,Real-time RT PCR和Western blot验证基因芯片数据的结果。根据基因表达谱数据,以 Gene Ontology 分类(GO 分类)筛选确定免疫相关基因,进行了免疫基因动态变化规律的体外研究及免疫动态变化规律的体内研究。随后进行了免疫相关信号通路的初步筛选;各个可能信号通路中关键蛋白磷酸化水平的体外、体内研究以及信号通路被抑制后与NCFM共培养的Caco-2细胞中相关免疫基因的表达变化研究。通过分析信号通路被选择性抑制后的表现,进一步确定 NCFM 促使宿主产生免疫调节作用的信号通路以及它们之间的相互联系,从而全面、深入揭示其调节机体免疫功能的作用机制,为开发更为科学、健康的益生功能食品提供理论依据。