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猪hsp70和hsp90荧光定量RT—PCR检测方法的建立
  • ISSN号:1000-2030
  • 期刊名称:《南京农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.3[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095, [2]聊城大学农学院,山东聊城252059, [3]农业部动物检疫所,山东青岛266032
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30430420,39770569,30170682);中德农业科技合作项目
中文摘要:

根据hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA序列,设计并合成3对引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,系列稀释作为阳性标准品,用于标准曲线的绘制和样品检测,并用持家蛋白GAPDH基因对样品进行归一化,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并对其扩增效率、敏感性、特异性进行了检测。结果证明,建立的一步法荧光定量RT—PCR技术可以真实地反映反应管中模板的数量,可用于猪矗驴。、hsp。和GAPDH基因mRNA水平的检测。

英文摘要:

According to the specific sequence of hsp90, hspgo and GAPDH mRNA, the primers were designed and synthesized. The fragments generated by RT-PCR were cloned into the pGEM-T vector. The positive recombinant plasmids were used to transcript RNA in vitro and the RNA were used as standard quantitative template to make the standard curve and establish fluorescence quanti- tative RT-PCR ( FQ RT-PCR) method. The efficiency, sensitivity and specificity of the RT-PCR method were tested. The results showed that the FQ RT-PCR method was external and could be used to detect the hsp70, hsp90 and GAPDH mRNA transcription of pigs.

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期刊信息
  • 《南京农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编:郑小波
  • 地址:江苏省南京市卫岗1号
  • 邮编:210095
  • 邮箱:nauxb@njau.edu.cn
  • 电话:025-84395214
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2030
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1148/S
  • 邮发代号:28-53
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,全国优秀科技期刊,第二届江苏省十佳科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:22558