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荷包猪SLA-2原核表达系的建立及表达研究
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连116622
  • 相关基金:辽宁省博士启动基金项目(No.20081078); 大连大学本科生创新教育基金项目(No.2010023)联合资助
中文摘要:

目的:建立荷包猪SLA-2原核表达系并研究SLA-2在pET-32中的表达。方法:设计SLA-2胞外区的表达引物,亚克隆荷包猪SLA-2的胞外区,并转化入原核表达系统pET-32进行表达,SDS-PAGE分析其表达产物的特性。结果:PCR结果显示,SLA-2胞外区亚克隆大小为840bp,酶切鉴定证实成功插入pET-32表达载体,构建重组质粒pET-32a(+)/SLA-2。SDS-PAGE显示,SLA-2基因导入宿主菌后成功表达,蛋白大小为51.4ku,与预期结果相符,蛋白相对表达含量达到了45%。结论:结果表明荷包猪SLA-2在pET-32系统中成功表达,蛋白表达量符合要求,可用于下一步的结构和功能检测。

英文摘要:

Objective:To construct the SLA-2 Prokaryotic Expressing System of HeBao Pig,and study on the expression of SLA-2 in pET-32.Method:A pair primer to express the extrocellular domain of SLA-2 was designed and the extrocellular domain of SLA-2 was sub-cloned into pET-32 followed by transforming into Escherichia coli BL21(DE3) and then analysis of the character of expressing products by SDS-PAGE.Result: The PCR results were shown that the length of nucleotides in extracellular domain of SLA-2 was about 840bp which was consistent with the calculated value.In addition,the SLA-2 was proved to be inserted into the pET-32 by cleavage with EcoR Ⅴ and Xho Ⅰ and the constructed expressing vector was named as pET-32a(+)/SLA-2.By SDS-PAGE,SLA-2 was successfully expressed in Escherichia coli BL21(DE3) and the interest of protein was about 51.4 ku with the 45 percent of relative expressed content of recombinant SLA-2 protein Conclusion: Ii was concluded that the SLA-2 had been expressed in pET-32 Prokaryotic Expressing System and the content of expressed protein satisfied to the need,which would be used to study structure and function of SLA-2.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503