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蚕丝蛋白固相萃取分离富集细胞色素c的研究
  • ISSN号:0251-0790
  • 期刊名称:《高等学校化学学报》
  • 时间:0
  • 分类:O652.62[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]东北大学分析科学研究中心,沈阳110004
  • 相关基金:国家自然科学基金面上项目(批准号:20805004),国家自然科学基金重点项目(批准号:20635010)以及国家杰出青年科学基金(批准号:20725517)资助.
中文摘要:

在特定实验条件下,蚕丝蛋白对细胞色素c表现出选择性吸附.以蚕丝蛋白微填充柱为载体,在流动系统中建立了细胞色素c的分离富集方法,以分光光度法在410nm处检测分离富集过程.在进样流速低于10μL/s时,2mL样品溶液(pH=5.6的水溶液)中5μg/mL的细胞色素c可被蚕丝蛋白微柱完全吸附,而在洗脱流速低于15μL/s时,200μL NaCl溶液(1.0mol/L)可将吸附的细胞色素c完全洗脱,分离富集系数为10.用本方法测定细胞色素c的线性范围为1.0~10.0μg/mL,检出限为0.33μg/mL,精密度RSD为2.5%(5μg/mL,n=9).此外,还采用本文方法对人全血中的蛋白质进行了分离富集,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了分离后蛋白的纯度.

英文摘要:

Selective adsorption of cytochrome c using silk fibroin as adsorbent was observed under certain experimental conditions. A novel separation and preconcentration approach for cytochrome c was thus developed via a silk fibroin packed micro-column in a sequential injection system. The entire process of separation and elution was monitored by spectrophotometry at 410 nm. At pH 5.6, cytochrome c in 2 mL of aqueous solution at 5 g/mL were quantitatively adsorbed by the silk fibroin micro-column, and a NaC1 solution of 1.0 mol/L suffices the complete elution of the adsorbed cytochrome c from the micro-column. An enrichment factor of 10 was achieved by fixing a sample volume of 2 mL and an eluent volume of 200 μL. A linear calibration graph within 1.0-10. 0 μg/mL cytochrome c was obtained with a detection limit of 0.33 μg/mL and a precision (RSD) of 2.5 % (5 μg/mL, n = 9 ). The practical applicability of this system was demonstrated by processing human whole blood for preconcentration of cytochrome c, and the results were verified by assay with SDSPAGE.

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期刊信息
  • 《高等学校化学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学 南开大学
  • 主编:周其凤
  • 地址:吉林大学南胡校区
  • 邮编:130012
  • 邮箱:cjcu@jlu.edu.cn
  • 电话:0431-88499216
  • 国际标准刊号:ISSN:0251-0790
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1131/O6
  • 邮发代号:12-40
  • 获奖情况:
  • 首届及第二届国家期刊奖,连续两届“百种中国杰出学术期刊”,中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:50676