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禽致病性大肠杆菌未知功能基因突变株的构建及致病特性分析
  • ISSN号：0529-5130
  • 期刊名称：《畜牧与兽医》
  • 时间：0
  • 分类：S852.6[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构：[1]江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300, [2]扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏扬州225009, [3]扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏扬州225009
  • 相关基金：国家自然科学基金（30471281）; 国家杰出青年科学基金（30425031）; 国家“863”计划（2006AA10A206）
作者： 刘静[1], 徐亚亚[1], 卢炜[1], 陈祥[2], 高崧[3]
关键词： 禽致病性大肠杆菌, 抑制差减杂交, 基因插入突变株
中文摘要：

采用抑制差减杂交技术（SSH）对禽致病性大肠杆菌（APEC）高致病株E037（血清型O78）与非致病菌株K-12 MG1655进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个特异性差异片段,选取其中的编号为88#的基因进行突变株的构建。通过PCR扩增出88#的目的基因片段,并插入到T-easy载体的多克隆位点中,随之克隆到p MEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体p MEG375-88#,将突变载体转化到受体APEC E037中,根据同源重组原理,筛选出E03788#基因插入突变株E037-1。对21日龄白来航SPF鸡右胸气囊分别接种E037、E037-1株0.1 mL（108cfu/mL）,在6,24和48 h分别扑杀SPF鸡,无菌采集血液、心脏、肝、脾、左肺、肾进行细菌学检查,同时进行病变观察。结果显示：接种鸡6 h后,E037-1在肝、脾和肺中的细菌数比E037明显降低,差异极显著（P〈0.01）;接种鸡24 h后,E037-1在心脏、肝、脾和肺中的细菌数与E037比较有所降低,差异显著（P〈0.05）;接种鸡48 h后,E037-1在心、肝中的细菌数比E037明显降低,差异极显著（P〈0.01）,说明E037-1突变株的致病性明显下降。结果显示88#基因可能是APEC的致病相关基因,其功能值得进一步研究。

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期刊信息
  • 《畜牧与兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编：石放雄
  • 地址：江苏省 南京市 卫岗1号南京农业大学内
  • 邮编：210095
  • 邮箱：muyizz@mnjau.edu.cn
  • 电话：025-84395701
  • 国际标准刊号：ISSN：0529-5130
  • 国内统一刊号：ISSN：32-1192/S
  • 邮发代号:28-42
  • 获奖情况:
  • 全国中文核心期刊,全国畜牧兽医期刊评比一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2004版）,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）,中国北大核心期刊（2000版）
  • 被引量:17624