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猪源脑心肌炎病毒单克隆抗体研制与免疫学特性测定
  • ISSN号:0529-5130
  • 期刊名称:《畜牧与兽医》
  • 时间:0
  • 分类:S852.4[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室,江苏南京210095
  • 相关基金:国家生猪产业技术体系专项(CARS-36),农业行业公益项目(201003060-04)和全国农业科研杰出人才与创新团队项目(C0201200632)
中文摘要:

利用纯化灭活的猪源脑心肌炎病毒(EMCV)免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,研制获得4株能稳定分泌抗EMCV抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1D1、2A2、286和4E2。经ELISA测定,细胞培养上清中抗体效价分别为1:1600,1:6400,1:6400和1:3200,小鼠腹水抗体效价分别为1:1.63×10^6,1:3.28×10^6,1:1.13×10^6和1:5.63×10^5。1D1和2A2单抗亚类为IgGl,286和4E2单抗亚类为IgG2b,轻链均为K型。Westemblot结果表明,1D1、2A2和4E2能特异性识别病毒的VP1蛋白,286能特异性识别病毒的VP2蛋白。间接免疫荧光试验证明,4株单抗具有良好的特异性,均能识别EMCV。本研究获得的4株特异性单抗,将为EMCV诊断方法的建立和病毒蛋白功能的研究奠定基础。

英文摘要:

The purified encephalomyocarditis virus (EMCV) from swine was used to immunize BALB/c mice, and the stimulated spleno- cytes were fused with myeloma cells of SP2/0 to produce hybridomas. Four stable murine monoclonal cell lines producing antibodies (McAbs) against EMCV were generated and named as 1D1, 2A2, 2B6 and 4E2, respectively. The titers of the four McAbs in the superna- tant of cell culture were 1 : 1 600, 1 : 6 400, 1 : 6 400 and 1 : 3 200, respectively, and the titers in ascites were 1 : 1.63×10^6, 1 : 3.28 ×10^6 , 1 : 1.13×10^6 and 1 : 5.63×10^5, respectively. 1D1 and 2A2 belong to the IgG1 subtype, while 2B6 and 4E2 belong to the IgG2b subtype. All of the McAbs hadKlight chain. Western blot analysis indicated that 1 D1,2A2 and 4E2 could react with VP1 protein of EMCV, while 2B6 was able to recognize the VP2 protein of EMCV. The indirect immunofluorescence assay results showed that all of them could react with BHK-21 cells infected by EMCV, indicating that the four McAbs had good specificity and can be used for the diagnosis of EMCV. This study provides a basis for the functions of viral proteins.

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期刊信息
  • 《畜牧与兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编:石放雄
  • 地址:江苏省 南京市 卫岗1号南京农业大学内
  • 邮编:210095
  • 邮箱:muyizz@mnjau.edu.cn
  • 电话:025-84395701
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-5130
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1192/S
  • 邮发代号:28-42
  • 获奖情况:
  • 全国中文核心期刊,全国畜牧兽医期刊评比一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:17624