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牛疱疹病毒gD-PCR鉴别检测方法的建立
  • ISSN号:1004-4264
  • 期刊名称:《中国奶牛》
  • 时间:0
  • 分类:S858.23[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉430070, [2]华中农业大学动物科技学院,武汉430070, [3]华中农业大学动物医学院,武汉430070
  • 相关基金:农业公益性行业科研专项(200803018 201003060); 现代农业(肉牛)产业技术体系专项经费资助
中文摘要:

建立一种PCR技术,既能快速检测疱疹病毒1型成员牛传染性鼻气管炎病毒(bovine infectious rhinotracheitisvirus,IBRV),又能区分牛疱疹病毒5型和伪狂犬病毒。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒的gD基因序列,应用primer 5.0软件设计了gD PCR引物,建立PCR方法,反应条件是:94℃预变性5min,94℃1min,58℃1min,72℃1min,30个循环,72℃7min,4℃5min。该方法能从IBRV阳性样本和参考毒株中扩增出372bp的目的片段,而从同属的牛疱疹病毒5型中扩增出440bp和206bp两条目的片段,从同属的伪狂犬病毒中扩增出303bp的目的片段,但不能从非疱疹病毒属成员猪呼吸与繁殖综合征病毒中扩增出目的条带。该PCR检测IBRV的灵敏度可达1PFU/mL以上。鉴于其灵敏度高、特异性好,可望在牛疱疹病毒感染快速鉴别检测方面发挥重要作用。

英文摘要:

A PCR method was established successfully to differentiallly detect bovine herpes viruses including Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus(IBRV),Bovine Herpes Virus 5 and psuedorabies virus.The primers specific to IBRV gD gene were designed and the PCR condition was optimized as follows: 94℃ 5min,94℃ 1min,58℃ 1min,72℃ 1min for 30 cycles,72℃ 7min,4℃ 5min.This PCR can amplify one specific fragment of 372bp for IBRV,two fragments 440bp and 206bp for bovine herpesvirus type 5,and one fragment of 303bp for pseudorabies virus.On the othe hand,it couldnot amplify any fragment for non-related virus Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV).The sensitivity of this gD-PCR is 2PFU/mL or 5×10-5TCID50/mL.Due to its high specificity and sensitivity,it would play an important role in rapid differential diagnosis of bovine herpesvirus infection.

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期刊信息
  • 《中国奶牛》
  • 主管单位:农业部
  • 主办单位:中国奶业协会 北京四而博达广告有限公司
  • 主编:杨秀文
  • 地址:北京市农科院北京畜牧兽医研究所3号楼214#、216#
  • 邮编:100193
  • 邮箱:zgnn126@126.com
  • 电话:010-62673004 62673764
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-4264
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3009/S
  • 邮发代号:80-401
  • 获奖情况:
  • 2008年度全国牛业优秀期刊一等奖,2007、2008、2009年度奶农最喜爱科技期刊奖,国家奶牛产业技术体系优秀期刊奖,农业部奶牛科技入产示范工程优秀期刊奖,中国科技核心期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:9111