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牛腺病毒3型六邻体蛋白的截短表达、单克隆抗体制备及初步应用
  • ISSN号:1008-0589
  • 期刊名称:《中国预防兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001
  • 相关基金:公益性行业(农业)科研专项经费(201003060-04);哈尔滨市科技攻关计划(2012AA6BN020);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(0302012002);国家科技支撑计划子课题(2012BAD12B03-3)
中文摘要:

为制备牛腺病毒3型(BAV-3)的单克隆抗体(MAb),本研究采用原核表达系统截短表达了BAV-3六邻体蛋白(Hexon),并以纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合筛选出14株杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验表明14株MAbs均具有良好的反应性。特异性试验表明这些MAbs与牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒及牛传染性鼻气管炎病毒无交叉反应。免疫组化试验表明其中一株1F8亲和力最强,可以用于检测BAV-3。本研究为进一步鉴定BAV-3抗原表位及研发相应的诊断试剂奠定了基础。

英文摘要:

Bovine adenovirus type 3 (BAV-3) is considered one of the most important respiratory tract agents of cattle diseases. To prepare monoclonal antibodies (MAbs) against Hexon protein of BAV-3, the SP2/0 cells were fused with the splenic cells from BALB/c mice immunized with truncated Hexon protein expressed in E.coli and 14 hybridomas secreted MAbs against BAV-3 were obtained after screening by indirect ELISA based on BAV-3. All the MAbs were positively reacted with BAV-3 detected by western blot and indirect immunofluorescence assay. Further specific assays indicated that 14 MAbs were specific to BAV-3, but not cross-reacted with bovine parainfluenza virus type 3, bovine viral diarrhea virus and bovine herpesvirus type 1 by ELISA assays. In addition, the MAb 1F8 had the higher antibody affinity which was suitable for detecting BAV-3 in animal tissue sample by immunohistochemistry test. The preparation of the MAbs provided the basis for fiLrther epitope identifications of BAV-3 hexon protein and development of diagnostic methods for BAV-3 infection.

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期刊信息
  • 《中国预防兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
  • 主编:步志高
  • 地址:哈尔滨市香坊区哈平路678号
  • 邮编:150001
  • 邮箱:zgyfsyxbhvri@163.com
  • 电话:0451-51051811 51051812
  • 国际标准刊号:ISSN:1008-0589
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1417/S
  • 邮发代号:14-70
  • 获奖情况:
  • 全国农业优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12844