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二维电泳和质谱技术鉴定BmNPV包埋型病毒粒子的蛋白组成
  • ISSN号:0578-1752
  • 期刊名称:《中国农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:S884.51[农业科学—特种经济动物饲养;农业科学—畜牧兽医] Q945.11[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]江苏大学生命科学研究院,江苏镇江212013
  • 相关基金:“973”计划(2005CB121000);江苏大学青年科学基金资助项目(1241330001)
中文摘要:

【目的】BmNPV包埋型病毒ODV(occlusion-derived virus)粒子在BmNPV感染家蚕初期起了非常重要的作用,主要包含了病毒感染初期所必须的蛋白质,解析其蛋白组成有利于进一步理解病毒和宿主关系,同时也为了进一步了解BmNPV的生活史提供依据。【方法】利用二维电泳对ODV病毒蛋白进行分离,采用考马斯亮兰G-250染色,经质谱鉴定。【结果】共获得70个蛋白点,大部分集中在等电点5~9之间,约占蛋白点总数的61%。其中59个蛋白点适合质谱分析,数据库检索出20种蛋白,其中13种与AcMNPV中鉴定一致,而另7种蛋白是BmNPV中新鉴定出来的。此外,在二维电泳图谱上显示GP41蛋白点有21个,VP39蛋白点有9个。【结论】超速离心结合PCR技术提取ODV蛋白方法可行;二维电泳和质谱联用技术是一种研究病毒蛋白质组快速有效的方法。

英文摘要:

[Objective] The occlusion-derived virus (ODV) is produced when nucleocapsids retained in the nucleus are enveloped using virus-induced intranuclear membranes which appear to be derived from the nuclear membrane.It is specially adapted for primary infection of the host midgut epithelium. As such, the virion must contain the proteins essential for host range determination and initiation of infection. So knowledge of virion composition is a prerequisite for functional investigation. [ Method ] In the present study, two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry techniques were used to identify the proteins present within or associated with the occlusion-derived virus (ODV) virion, the separated proteins were visualized by Coomassie-Brilliant- Blue-G-250 staining. All protein spots were identified by MS. [Result] The separated proteins revealed 70 spots for the sample. Among them, most proteins were concentrated in pI 5-9, which reached 61% of the total protein spots. The results of this study suggest that 20 proteins were identified with confidence. Interestingly, the result showed that 21 spots of GP41 and 9 spots of VP39 were identified from the gel, respectively. [ Conclusion ] It is feasible to extract ODV protein by a combination of ultracentrifugation and PCR technique; two-dimensional gel electrophoresis combined with mass spectrometry is a rapid and effective way of studying virus proteomics.

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期刊信息
  • 《中国农业科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院 中国农学会
  • 主编:万建民
  • 地址:北京中关村南大街12号中国农业科学院图书馆楼4101-4103室
  • 邮编:100081
  • 邮箱:zgnykx@caas.cn
  • 电话:010-82109808 82106279
  • 国际标准刊号:ISSN:0578-1752
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1328/S
  • 邮发代号:2-138
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双高”期刊,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:85620