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家蚕变应原tropomyosin基因的克隆表达、纯化及其免疫学活性鉴定
  • ISSN号：1000-8861
  • 期刊名称：《免疫学杂志》
  • 时间：0
  • 分类：R392[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构：[1]深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所
  • 相关基金：国家973计划(2005CB121000);; 广东省科技重点专项(2003A3080502);; 深圳市科技计划(200326)资助
作者： 刘志刚[1], 邬玉兰[1], 杨睿[1], 吴海强[1]
关键词： 家蚕, 重组变应原tropomyosin, 基因表达, 蛋白纯化, Bombyx mori, tropomyosin, expression, purification
中文摘要：

目的对家蚕过敏原tropomyosin基因进行克隆表达,鉴定其免疫学活性。方法本研究提取家蚕总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出tropomyosin片段,其长度为858bp,编码286个氨基酸。通过连入载体PET28a在大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)菌株中通过IPTG诱导得到重组家蚕原肌球蛋白。重组家蚕原肌球蛋白经过6His-tag蛋白纯化系统分离、纯化。经Westernblot检测该重组蛋白与家蚕过敏患者血清中IgE的反应性。结果19个病人血清反应中,有5个呈阳性,阳性率为26%。结论成功克隆表达了家蚕tropomyosin基因,经免疫学鉴定发现其具有过敏原性。

英文摘要：

Objective To clone and express the gene of silkworm (Bombyx mori) tropomyosin,and detect the immunological activity of silkworm tropomyosin. Methods Tropomyosin of silkworm was amplified from total RNA by RT-PCR. The length of the silkworm tropomyosin fragment was 858 bp including an open reading frame coding for 286 amino acids. The recombinant silkworm tropomyosin was expressed in Escherichia coli BL21(DE3) after vector PET28a transfection,and then the recombinant protein was purified by affinity chromato...

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期刊信息
  • 《免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学 中国免疫学会
  • 主编：吴玉章
  • 地址：重庆市沙坪坝高滩岩
  • 邮编：400038
  • 邮箱：richard@mail.tmmu.com.cn
  • 电话：023-68752237
  • 国际标准刊号：ISSN：1000-8861
  • 国内统一刊号：ISSN：51-1332/R
  • 邮发代号:78-32
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊三等奖,全军优秀医学期刊奖,重庆市优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘（网络版）,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2004版）,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）,中国北大核心期刊（2000版）
  • 被引量:13273